基础研究
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世界华人消化杂志. 2006-05-28; 14(15): 1458-1461
Published online 2006-05-28. doi: 10.11569/wcjd.v14.i15.1458
hIL-10基因修饰的L02肝细胞的克隆培养和最高表达株的筛选
代文杰, 胡震, 武林枫, 姜洪池, 吴耀华, 潘尚哈
代文杰, 胡震, 武林枫, 姜洪池, 吴耀华, 潘尚哈, 哈尔滨医科大学第一临床医学院肝胆胰外科, 黑龙江省肝脾外科重点实验室 黑龙江省哈尔滨市 150001
代文杰, 博士, 博士后, 主要从事肝胆胰外科、器官移植、外科分子细胞生物学研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 30070739, 30300340; 黑龙江省自然科学基金资助项目, No. D01-04.
通讯作者: 代文杰, 150001, 黑龙江省哈尔滨市, 哈尔滨医科大学第一临床医学院肝胆胰外科, 黑龙江省肝脾外科重点实验室. wenjdai@yahoo.com.cn
电话: 0451-53600281
收稿日期: 2006-03-30
修回日期: 2006-04-09
接受日期: 2006-04-13
在线出版日期: 2006-05-28
Abstract

目的: 确认hIL-10基因修饰的L02肝细胞的克隆培养可实现hIL-10在L02肝细胞中的高效表达.

方法: 通过构建真核质粒表达载体pchIL-10, 并纯化后转染L02肝细胞. 通过G418的压力选择获得hIL-10高表达的克隆株, 并以ELISA测定其表达水平.

结果: 经过测序和酶切验证, 真核质粒表达载体pchIL-10构建成功. 电泳显示一长约540 bp条带. hIL-10基因转导可在L02肝细胞中实现hIL-10的高效表达. 最高表达株表达量为每小时69.875 ng/106细胞.

结论: hIL-10基因修饰的L02肝细胞的克隆培养可实现hIL-10的高效表达, 为抗肝纤维化、肝硬化提供有效途径.

Keywords: 白细胞介素10; 基因转导; 肝纤维化; 肝硬化