Published online 2006-05-28. doi: 10.11569/wcjd.v14.i15.1448
修回日期: 2006-03-19
接受日期: 2006-03-29
在线出版日期: 2006-05-28
目的: 研究Caveolin-1对胃癌细胞增殖、分化的影响, 以探讨Caveolin-1作为基因治疗的候选基因的可能性.
方法: 运用基因重组技术, 将人全长Caveolin-1基因稳定转染胃癌细胞系MGC803,建立能稳定表达Caveolin-1的胃癌细胞系, 同时建立空载体转染的MGC803细胞系作为空白对照, 另用PD98059处理48 h作为阳性对照. 以重组细胞系作为研究模型, 通过免疫细胞化学及Western blot确认Caveolin-1蛋白在被转染细胞中的稳定表达. 运用光学显微镜观察转染前后MGC803细胞形态的变化; 另运用细胞计数检测了Caveolin-1对MGC803细胞生长的影响, 流式细胞术分析了Caveolin-1对MGC803细胞周期分布的影响.
结果: Western blot 结果显示, 基因转染组及阳性对照组细胞中Vaveolin-1表达比未处理组细胞中明显增强(P<0.001, q值分别为23.067与13.3376), 且基因转染组中Caveolin-1表达比阳性对照组更强(P<0.001, q = 9.7294); 基因转染后的MGC803细胞形态发生明显变化, 由异形性明显、核大、胞质很少、核分裂明显变得形态较一致、胞质丰富、核/质比明显变小、核分裂相很少见; 基因转染后细胞的群体倍增时间明显延长, 由46.67 h延长至65.46 h, 差异有统计学意义(P<0.05, q = 4.8695); 基因转染后细胞周期分布发生了明显变化, G0/G1期细胞数明显增多(P<0.01, q = 9.1824), S期细胞数明显减少(P<0.01, q = 7.827), G2/M期细胞数无明显变化(P>0.05), Caveolin-1基因转染组与阳性对照组间细胞周期分布的变化也有明显差异性(其中G0/G1期P<0.01, q = 4.9323; S期P<0.05, q = 3.3295).
结论: Caveolin-1既能诱导MGC803细胞分化又能将其阻滞于G0/G1期, 通过延长细胞群体倍增时间而抑制胃癌细胞的体外增殖.