基础研究
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世界华人消化杂志. 2006-04-18; 14(11): 1044-1047
Published online 2006-04-18. doi: 10.11569/wcjd.v14.i11.1044
TRF2小干扰RNA载体的构建及表达
宁寒冰, 李继昌, 刘志国, 樊代明
宁寒冰, 李继昌, 郑州大学第一附属医院消化内科 河南省郑州市 450052
刘志国, 樊代明, 国家肿瘤生物学重点实验室 第四军医大学西京医院全军消化病研究所 陕西省西安市 710032
宁寒冰, 郑州大学医学院博士生, 主要从事消化道肿瘤的研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 30400016.
通讯作者: 刘志国, 710032, 陕西省西安市长乐西路15号, 第四军医大学西京医院消化病研究所. liuzhiguo@fmmu.edu.cn
电话: 029-84775229
收稿日期: 2006-01-03
修回日期: 2006-01-11
接受日期: 2006-01-25
在线出版日期: 2006-04-18
Abstract

目的: 构建TRF2小干扰RNA载体, 观察其在胃癌细胞中的表达.

方法: 根据pSilencer3.1-H1载体要求设计两对小干扰RNA, 退火后连接入载体相应位点. 经双酶切及测序鉴定后分别转染多药耐药衍生胃癌细胞SGC7901/ADR和SGC7901/VCR. G418选择培养液培养2 mo选取转染组及对照组细胞克隆. MTT法检测转染对细胞生长增殖速度的影响. 细胞用阿霉素和足叶乙甙处理6 h后Western blot法检测TRF2表达.

结果: 成功构建TRF2小干扰RNA载体, 建立稳定转染细胞株, 转染后TRF2表达明显降低, 对细胞的生长增殖速度无明显影响(P>0.05).

结论: 成功构建TRF2小干扰RNA载体及稳定转染细胞株.

Keywords: 端粒重复序列结合因子2; 胃癌; 小干扰RNA