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抑制gankyrin的表达对肝癌细胞系HepG2增殖的影响
杨诏旭, 窦科峰, 中国人民解放军第四军医大学西京医院肝胆外科 陕西省西安市 710032
路凡, 卢兹凡, 赵忠良, 中国人民解放军第四军医大学基础部分子生物学教研室 陕西省西安市 710032
杨诏旭, 男, 1976-06-27生, 山东省青岛市人, 汉族, 2002年第四军医大学外科学硕士, 2002年西京医院肝胆外科博士生.
通讯作者: 窦科峰, 710032, 陕西省西安市, 中国人民解放军第四军医大学西京医院肝胆外科. yzxlcy@163.com
电话: 029-82500093
收稿日期: 2005-02-14
修回日期: 2005-03-01
接受日期: 2005-03-03
在线出版日期: 2005-04-15
修回日期: 2005-03-01
接受日期: 2005-03-03
在线出版日期: 2005-04-15
Abstract
目的: 探索通过RNA干涉技术抑制gankyrin的表达对肝癌细胞系HepG2增殖及细胞周期的影响.
方法: 建立稳定表达靶向gankyrin的shRNA的HepG2细胞系. 通过Western blotting验证基因表达的抑制效果. 采用细胞计数及MTT法检测细胞的增殖能力. 流式细胞仪分析细胞周期.
结果: 抑制gankyrin基因的表达显著抑制了HepG2细胞的生长, 与转染阴性对照shRNA质粒细胞相比, 细胞计数示细胞数目明显减低(d 6: 24.4×103±5.2×103vs 123.3×103±2.8×103, P<0.05), MTT分析显示细胞增殖率明显下降(144 h: 7.53±0.50 vs 16.30±0.38, P<0.05), 流式细胞分析示细胞周期阻滞在G1期(G1: 71.63±3.60% vs 52.57±2.82%, P<0.05).
结论: 在HepG2细胞中抑制gankyrin的表达可有效抑制细胞生长并导致细胞周期的阻滞. 利用RNA干涉技术抑制gankyrin的表达可能会成为一种有效的肝癌基因治疗手段.
Keywords: Gankyrin; RNA干涉; 肝细胞癌