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苦参碱对L-02人肝细胞系液氮下冻存复苏后功能的影响
朱应乾, 高毅, 汪燕, 南方医科大学珠江医院普外科 广东省广州市 510280
基金项目: 广东省科技计划重大项目, No. 2002A3020206.
通讯作者: 高 毅, 510280, 广东省广州市工业大道, 南方医科大学珠江医院普外科. Gaoyi6146@163.com
电话: 020-61643211
收稿日期: 2005-01-24
修回日期: 2005-02-21
接受日期: 2005-03-03
在线出版日期: 2005-04-01
修回日期: 2005-02-21
接受日期: 2005-03-03
在线出版日期: 2005-04-01
Abstract
目的: 了解苦参碱(matrine)对L-02人肝细胞系超低温冻存复苏后功能的影响, 探索一种合适肝细胞保存的方法.
方法: 常规培养的L-02人细胞系用胰酶消化后, 将收集的L-02人细胞系分别以六种不同的冻存液(二甲基亚砜、二甲基亚砜+低分子右旋糖苷、二甲基亚砜+低分子右旋糖苷+0.2 mg/L苦参碱、二甲基亚砜+低分子右旋糖苷+2 mg/L苦参碱、二甲基亚砜+低分子右旋糖苷+6 mg/L苦参碱、二甲基亚砜+低分子右旋糖苷+10 mg/L苦参碱)在液氮中冷冻保存1 mo.1 mo后快速复苏L-02人肝细胞系, 做存活率、形态学及功能检测.
结果: 含有不同浓度的苦参碱冻存液保存的L-02人肝细胞系其活率、形态学及功能表现均有所不同, 其中单用二甲基亚砜(DMSO)的冻存液效果最差; 二甲基亚砜+低分子右旋糖苷(Detrax-40)+6 mg/L苦参碱冻存液效果最佳. 二甲基亚砜+低分子右旋糖苷(Detrax-40)+6 mg/L苦参碱冻存液组复苏后L-02人肝细胞系存活率为(89.6%±3.4%), 细胞形态与未冻存组相似, 其尿素及白蛋白分泌量与其他冻存液组有显著差异(P<0.05).
结论: 二甲基亚砜+低分子右旋糖苷+6 mg/L苦参碱联合冻存液显著提高了L-02人肝细胞系的冻存质量.
Keywords: 无