病毒性肝炎
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世界华人消化杂志. 2005-03-15; 13(6): 724-728
Published online 2005-03-15. doi: 10.11569/wcjd.v13.i6.724
干扰素作用下乙型肝炎病毒的变异机制
王卫峰, 周晓东
王卫峰, 浙江医院消化内科 浙江省杭州市 310013
周晓东, 中山大学附属第二医院医学研究中心 广东省广州市 510120
王卫峰, 男, 1977-03-18生, 河南省卫辉市人, 汉族, 2000年中山医科大学硕士, 住院医师. 主要从事病毒性肝炎的研究.
基金项目: 国家科技部973计划项目, No. G1999054105.
通讯作者: 周晓东, 510120, 广东省广州市沿江西路107号, 中山大学附属第二医院医学研究中心. xdzhou@public.guangzhou.gd.cn
电话: 020-81215583
收稿日期: 2004-12-17
修回日期: 2005-01-15
接受日期: 2005-01-26
在线出版日期: 2005-03-15
Abstract

目的: 体外研究干扰素-α2b(IFN-α2b)作用下乙肝病毒(HBV)突变机制.

方法: 以不同浓度IFN-α2b反复作用于HBV分泌型HepG2.2.15细胞, Western blot方法检测培养细胞上清中AFP, 提取培养细胞上清中HBV基因组DNA, 以聚合酶联反应扩增HBV C基因, 克隆入pGEM-T easy载体, 鉴定后行测序分析.

结果: Western blot方法检测各组培养细胞上清中AFP, 实验组AFP未见明显减少; 序列分析表明, 对照组前C/C基因克隆有两种类型, 同源性93%, 有10个氨基酸的差别, 其中6个氨基酸相比, 氨基酸的性质相同; 实验组同样具有这两种克隆, 其中优势株所占比例分别为12/15、14/14和9/15, 高剂量组与对照组相比优势株所占比例差异有统计学意义(P<0.05); 实验组高剂量IFN组出现了四个插入/缺失突变克隆, 造成前C/C基因移框突变, 其中C31-2插入突变发生在前C区, 另外3个突变均发生在C区, 与优势株相比平均同源性97%以上.

结论: 在rhIFN-α高剂量条件选择下, 能检测到HepG2.2.15 HBV前C/C基因插入或缺失突变株, 突变株与优势株相比基因序列同源性平均在97%以上.

Keywords: 干扰素-α2b; 乙肝病毒; 突变