研究快报
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世界华人消化杂志. 2005-02-01; 13(3): 394-397
Published online 2005-02-01. doi: 10.11569/wcjd.v13.i3.394
NHE1基因调控细胞内酸碱平衡对胃癌细胞生物学行为的影响
滕小春, 刘海峰, 房殿春, 杨仕明, 陈刚, 王国安, 杨孟华
滕小春, 刘海峰, 房殿春, 杨仕明, 陈刚, 王国安, 杨孟华, 中国人民解放军第三军医大学西南医院全军消化专科中心 重庆市 400038
通讯作者: 刘海峰, 400038, 重庆市, 中国人民解放军第三军医大学西南医院全军消化专科中心. HaiFengLIU333@hotmail.com
电话: 010-88276549
收稿日期: 2004-12-07
修回日期: 2004-12-12
接受日期: 2004-12-28
在线出版日期: 2005-02-01
Abstract

目的: 通过基因转染技术, 研究NHE1反义基因对SGC-7901胃癌细胞生物学行为的影响, 探讨通过酸化细胞内环境诱导肿瘤细胞凋亡从而治疗胃癌的新方法.

方法: 利用亚克隆技术构建人NHE1反义结构基因哺乳动物真核表达质粒, 通过DOTAP脂质体介导的转染技术将反义真核表达质粒和空载体分别转入SGC-7901胃癌细胞中, 经聚合酶链反应(PCR)对转染基因的整合鉴定后, 观察基因转染对细胞形态学、细胞内pH值、体外生长状况、细胞周期以及双层软琼脂克隆形成能力和裸鼠成瘤力的影响.

结果: 光镜及透射电镜下细胞形态恶性程度降低. Anti-7901细胞胞内pH值显著低于Zeo-7901细胞和空白对照组SGC-7901细胞内pH值(6.77±0.05 vs 7.24±0.03, 7.26±0.03, P<0.01). Anti-7901细胞生长速度明显减慢, 出现接触抑制, 呈单层生长, 细胞凋亡率显著高于Zeo-7901细胞和空白对照组SGC-7901凋亡率(26.1% vs 5.12%, 4.48%, P<0.01). Anti-7901细胞在双层软琼脂中集落形成率显著低于Zeo-7901和空白对照组SGC-7901细胞(9±3.54‰ vs 40±4.53‰, 38.6±4.63‰, P<0.01). 接种Zeo-7901细胞和空白对照组SGC-7901细胞裸鼠皮下长出肿瘤, 成瘤率为100%, 而接种Anti-7901细胞裸鼠皮下未长出肿瘤, 成瘤率为0%.

结论: 反义技术干预可使NHE1基因表达下调, 导致细胞内酸化, 诱导细胞凋亡, 达到了有效治疗胃癌的目的, 为胃癌基因治疗提供了新的思路.

Keywords: N/A