研究快报
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世界华人消化杂志. 2005-12-28; 13(24): 2880-2883
Published online 2005-12-28. doi: 10.11569/wcjd.v13.i24.2880
CTGF靶向RNA干扰重组体的构建及序列分析
主余华, 张春清, 赵幼安, 褚衍六, 孙成刚
主余华, 张春清, 孙成刚, 山东大学山东省立医院消化内科 山东省济南市 250021
赵幼安, 褚衍六, 山东大学齐鲁医院消化内科 山东省济南市 250012
基金项目: 山东省卫生厅青年基金资助项目, No. 2005-25.
通讯作者: 张春清, 250021, 山东省济南市, 山东省立医院消化内科. zyh6698@yahoo.com.cn
电话: 0531-85186350
收稿日期: 2005-10-13
修回日期: 2005-10-25
接受日期: 2005-11-15
在线出版日期: 2005-12-28
Abstract

目的: 利用pEGFP质粒载体构建介导结缔组织生长因子 (CTGF) 短发夹RNA (short hairpin RNA, shRNA) 表达的质粒.

方法: 分别设计3对有小发夹结构的两条DNA序列, 经退火成互补双链, 再克隆至带有U6启动子的质粒载体pEGFP中, 构建重组体, 转化DH5α菌株, 提取质粒行酶切鉴定后, 进行测序分析.

结果: CTGF的sRNA片段被成功克隆到pEGFP质粒载体中, 3个重组质粒shRNA编码序列与设计的片段完全一致, 经酶切与测序证实构建成功.

结论: 成功构建了能表达CTGF shRNA的重组体, 为下一步探索肝纤维化基因治疗的新途径打好基础.

Keywords: 结缔组织生长因子; RNA干扰; 短发夹RNA; 质粒