研究快报
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世界华人消化杂志. 2005-12-28; 13(24): 2870-2873
Published online 2005-12-28. doi: 10.11569/wcjd.v13.i24.2870
应用RNA干扰沉默血管内皮生长因子基因抑制HCT116细胞增殖的实验研究
吕伟, 张超, 郭红, 刘伟, 郝迎学
吕伟, 张超, 刘伟, 郝迎学, 中国人民解放军第三军医大学附属西南医院普外科 重庆市 400038
郭红, 中国人民解放军第三军医大学附属西南医院消化科 重庆市 400038
吕伟, 男, 1972-2-27 生, 江苏省金坛市人, 硕士研究生, 主治医师, 主要从事胃肠道肿瘤的外科及分子生物治疗研究.
基金项目: 重庆市自然科学基金资助项目, No. csfc-2005BB5291.
通讯作者: 张超, 400038, 重庆市沙坪坝区高滩岩正街30号, 第三军医大学附属西南医院普外科. zhangchao@163.com
电话: 023-68765274
收稿日期: 2005-10-14
修回日期: 2005-10-25
接受日期: 2005-10-30
在线出版日期: 2005-12-28
Abstract

目的: 观察Pavu6＋27-VEGF siRNA重组体在细胞体内表达的血管内皮生长因子短发夹状RNA (shRNA) 能否有效地抑制人大肠癌HCT116细胞株的增殖.

方法: 将自行构建的表达短发夹状RNA的重组质粒转染到大肠癌HCT116细胞株中, 以空质粒Pavu6+27转染为对照, 经G418筛选, 流式细胞技术分析细胞周期分布, MTT 比色法检测细胞的生长抑制率.

结果: Pavu6+27-VEGF siRNA重组体能有效地抑制HCT116细胞株的生长增殖, 24、48、72 h移植率分别为15.32%±2.02%、28.54%±3.29%、40.32%±3.56%, 与对照组 (5.64%±1.42%、8.65%±2.30%、15.32%±3.52%) 相比有显著差异(P<0.05). 细胞周期中G0/G1比例升高, S期比例明显下降, 而空质粒Pavu6+27转染对HCT116细胞株增殖无抑制作用, 对细胞周期改变无影响.

结论: Pavu6＋27-VEGF siRNA重组体在细胞内表达的短发夹状RNA 能有效抑制人大肠癌细胞的增殖, 为质粒介导的RNAi 技术运用于大肠癌的基因治疗提供一定的实验依据.

Keywords: RNA干扰; 短发夹状RNA; 血管内皮生长因子; 细胞增殖