Published online 2005-12-28. doi: 10.11569/wcjd.v13.i24.2838
修回日期: 2005-10-27
接受日期: 2005-10-31
在线出版日期: 2005-12-28
目的: 研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, H. pylori)在大鼠胃黏膜上皮诱导细胞凋亡中的作用, 并初步探讨其中凋亡相关基因表达的情况, 为胃癌发病机制提供依据.
方法: H. pylori超声提取液来自Sydney SS-1 H. pylori菌株. 大鼠胃黏膜细胞OUMS-37为永生化细胞, 当细胞生长至60%融合时, 加入不同浓度的H. pylori超声提取液, 同时设置空白, 于培养的24-48 h收集细胞进行形态观察. Westhern blotting检测P53蛋白表达, Northern blotting检测bax、bcl-2 mRNA的表达.
结果: 细胞经H. pylori作用48 h后在高倍镜下观察到细胞核碎裂成大小不等的块状, 表现出细胞凋亡如细胞皱缩, 胞浆嗜碱性, 核染色质固缩致密, 核染色质断裂, 形成大小不等的胞内核小体, 部分细胞核膜消失, 核染色质聚集中细胞中央, 呈现分裂期的形态学等形态学特征, 对照组未出现以上特征性改变. 培养细胞经过H. pylori作用后提取DNA, 经15 g/L琼脂糖凝胶电泳, 在紫外线灯下观察呈现不连续的梯状结构电泳条带. 培养细胞经过H. pylori作用后, Westhern blotting显示P53 蛋白表达随H. pylori超声提取液浓度而升高, Northern blotting显示bax mRNA 表达随H. pylori浓度而增加, bcl-2 mRNA表达随H. pylori浓度而降低.
结论: H. pylori超声提取液可在体外诱导鼠胃黏膜上皮细胞凋亡. 其机制可能通过上调野生型P53蛋白和凋亡促进基因bax mRNA表达, 并下调凋亡抑制基因bcl-2 mRNA表达. 提示H. pylori感染可通过干扰胃上皮细胞增殖与凋亡之间的平衡在胃癌病因学中发挥作用.