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世界华人消化杂志. 2005-12-28; 13(24): 2833-2837
Published online 2005-12-28. doi: 10.11569/wcjd.v13.i24.2833
Published online 2005-12-28. doi: 10.11569/wcjd.v13.i24.2833
大鼠降结肠上皮γ-氨基丁酸及谷氨酸脱羧酶的表达特征
汪芳裕, 朱人敏, 中国人民解放军南京军区南京总医院消化内科 江苏省南京市 210002
Maemura Kentaro, Watanabe Masahito, 大阪医科大学解剖学教研室 日本大阪 569-8686
Katsu Ken-ichi, Hirata Ichiro, 日本大阪医科大学第二内科学教研室日 本大阪 569-8686
汪芳裕, 男, 1965-03-20生, 湖北麻城市人, 汉族, 2001年日本大阪医科大学博士, 副主任医师, 主要从事消化内科的基础和临床研究.
基金项目: 日中医学会笹川奖学金制度 (第22期) 和南京市留学回国人员科研活动择优资助课题 , 宁人字No. 2004-83 .
通讯作者: 汪芳裕, 210002, 江苏省南京市, 中国人民解放军南京军区南京总医院消化内科. wangf65@yahoo.com
电话: 025-80860020 传真: 025-80860119
收稿日期: 2005-10-25
修回日期: 2005-11-25
接受日期: 2005-12-08
在线出版日期: 2005-12-28
修回日期: 2005-11-25
接受日期: 2005-12-08
在线出版日期: 2005-12-28
Abstract
目的: 检测γ-氨基丁酸 (gamma-aminobutyric acid, GABA) 和谷氨酸脱羧酶 (glutamic acid decarboxylase, GAD) 在大鼠降结肠上皮的表达及分布特征, 并探讨GABA与上皮细胞分化增殖的关系.
方法: 用免疫荧光及激光共聚焦显微扫描技术, 检测GABA、GAD65及GAD67在大鼠降结肠上皮中的表达, 并以麦芽凝聚素组织化学染色与免疫荧光结合的双重染色显示GABA和GAD65表达细胞的分布特征. 同时, 用RT-PCR和原位分子杂交方法检测GAD mRNA的表达. 此外, 用3H-胸腺嘧啶放射自显影法显示降结肠上皮的增殖带.
结果: RT-PCR显示降结肠黏膜中GAD65及GAD67mRNA均阳性, 原位杂交显示阳性杂交信号主要分布在上皮细胞的隐窝和腔面, 且GAD65信号较GAD67强. GABA及GAD65 免疫反应阳性细胞主要分布在降结肠的腔面和隐窝的上1/3上皮细胞的胞质, 而GAD67阳性细胞仅分布腔面, 此外, GABA及GAD65阳性染色也见于黏膜固有层. 双重染色显示杯状细胞中GABA及GAD65均阴性. 3H-胸腺嘧啶标记阳性细胞主要在隐窝的中下段.
结论: GABA及GAD65分布在大鼠降结肠上皮的成熟带及功能带, GABA系统可能参与上皮细胞的分化与增殖的调节.
Keywords: γ-氨基丁酸; 谷氨酸脱羧酶; 结肠上皮; 大鼠