基础研究
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世界华人消化杂志. 2005-12-15; 13(23): 2742-2747
Published online 2005-12-15. doi: 10.11569/wcjd.v13.i23.2742
实验性肝纤维化大鼠肝脏中 TIMP-2 基因及蛋白表达阻断研究
聂青和, 张亚飞, 谢玉梅, 邵彬, 李军, 苟艳子, 周永兴
聂青和, 张亚飞, 谢玉梅, 邵彬, 李军, 苟艳子, 周永兴, 第四军医大学唐都医院传染病科/全军感染病诊疗中心 陕西省西安市 710038
聂青和, 男, 汉族, 1961年生, 医学博士、博士后, 主要从事传染病学临床与实验研究, 以第一作者发表论文及综述150余篇，主编学术专著3部, 现任《中国实用内科杂志》、《世界华人消化杂志》、《胃肠病学和肝病学杂志》、《肝脏》、《中国感染控制杂志》、《寄生虫病与感染性疾病》等8家学术专业杂志编委, 《实用肝脏病杂志》副主编, 《中华传染病杂志》、《中华消化杂志》特邀审稿人.
基金项目: 陕西省科技攻关项目(社发攻关), No. 2003K10G63.
通讯作者: 聂青和, 710038, 陕西省西安市新寺路1号, 中国人民解放军第四军医大学唐都医院传染病科、全军感染病诊疗中心. nieqinghe@hotmail.com
电话: 029-84777852 传真: 029-83537377
收稿日期: 2005-10-25
修回日期: 2005-11-01
接受日期: 2005-11-04
在线出版日期: 2005-12-15
Abstract

目的: 探讨以TIMP-2为靶基因, 应用反义寡核苷酸(asON)技术抑制其在肝组织中的表达对大鼠肝纤维化发展的影响.

方法: 22只大鼠分为治疗组(n = 6)、模型组(n = 6)和正常对照组(n = 10). 以人血白蛋白免疫攻击方法制备免疫诱导型肝纤维化大鼠模型. 模型制备过程中, 治疗组大鼠以尾静脉注射方式给予针对TIMP-2的硫代反义寡核苷酸. RT-PCR、原位杂交、免疫组化、ELISA等方法检测TIMP-2的转录以及表达水平. 用病理学检查以及Ⅰ、Ⅳ型胶原的免疫组化结果分析肝纤维化发展程度. 通过胶原纤维特殊染色及电镜等观察asON对大鼠肝纤维化的影响.

结果: 治疗组病理学分级状况优于模型组(u = 2.071, P<0.05). 治疗组血清TIMP-2低于模型组(T = 55, P<0.05), 高于正常对照组(T = 55, P<0.05). 治疗组肝组织TIMP-2 mRNA表达弱于模型组(t = 3.332, P<0.05), 高于正常对照组(t =5.550, P<0.05). Ⅳ型胶原免疫组化图像定量分析结果显示, 治疗组与模型组有显著差异(t = 2.310, P<0.05), 其表达较低, 但仍高于正常对照组(t = 3.623, P<0.05). 治疗组Ⅰ型胶原免疫组化图像扫描结果与模型组相比, 其数值亦较低(t = 2.845, P<0.05). 治疗组肝窦基底膜胶原沉积较轻, 与模型组无明显差异.

结论: 抑制TIMP-2在肝组织中的表达可以减缓大鼠肝纤维化发展.

Keywords: 反义寡核苷酸; 金属蛋白酶组织抑制因子-2; 肝纤维化; 大鼠