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世界华人消化杂志. 2005-11-28; 13(22): 2681-2684
Published online 2005-11-28. doi: 10.11569/wcjd.v13.i22.2681
Published online 2005-11-28. doi: 10.11569/wcjd.v13.i22.2681
胃癌高低发区差异基因型幽门螺杆菌菌株对人胃上皮细胞系GES-1的损伤作用
何红梅, 宫月华, 袁媛, 中国医科大学附属第一医院肿瘤研究所第三研究室 辽宁省沈阳市 110001
基金项目: 国家"十五"科技攻关资助项目 , No. 2004BA703B04-02 .
通讯作者: 袁媛, 110001, 辽宁省沈阳市和平区南京北街155号, 中国医科大学附属第一医院肿瘤研究所第三研究室. yyuan@mail.cmu.edu.cn
电话: 024-23256666-6153 传真: 024-22703576
收稿日期: 2005-08-01
修回日期: 2005-08-20
接受日期: 2005-08-26
在线出版日期: 2005-11-28
修回日期: 2005-08-20
接受日期: 2005-08-26
在线出版日期: 2005-11-28
Abstract
目的: 研究胃癌高、低发区差异基因型幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, H. pylori)菌株对永生化的非肿瘤胃上皮细胞GES-1的损伤作用; 并阐明H. pylori致细胞损伤的分子机制.
方法: 通过常规HE染色、Gimsa染色、W-S银染色鉴定H. pylori菌株, 采用蛋白酶K及酚-氯仿抽提法提取DNA, PCR法扩增cagA、vacAs1、s2、m1a、m1b、m2基因, 对H. pylori基因亚型进行检测. 利用细胞和幽门螺杆菌共培养技术, 观察胃癌高低发区差异基因亚型H. pylori以及其他两种非差异基因型H. pylori对胃上皮细胞系GES-1的损伤作用, 并通过免疫细胞化学方法检测GES-1细胞8-OHdG的表达.
结果: 幽门螺杆菌对GES-1细胞具有损伤作用, 随着作用时间的延长, GES-1细胞形态由贴壁的梭形变为圆形, 细胞核染色质浓缩, 呈新月形聚集于核缘, 细胞质浓缩, 可见空泡变性, 死亡细胞逐渐增多. 差异基因型H. pylori对GES-1细胞的损伤程度比非差异基因型的损伤作用重. 正常对照组8-OHdG表达基本阴性(0.5%), 而H. pylori处理组GES-1细胞8-OHdG表达阳性达98.5%, 二者差异显著(P<0.01), 有统计学意义.
结论: 胃癌高发区差异基因型H. pylori即cagA+, vacAs1+/m1b+对胃上皮细胞GES-1具有更强损伤作用, 其损伤具有时间依赖关系; H. pylori可能通过增加胃上皮细胞8-OhdG表达而导致正常胃黏膜上皮细胞恶性转化..
Keywords: 胃癌; 幽门螺杆菌; 差异基因型; 胃黏膜上皮细胞; 共培养; 8-OHdG