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世界华人消化杂志. 2005-11-28; 13(22): 2645-2649
Published online 2005-11-28. doi: 10.11569/wcjd.v13.i22.2645
Published online 2005-11-28. doi: 10.11569/wcjd.v13.i22.2645
端粒酶逆转录酶肽-核酸病毒样颗粒疫苗的制备及免疫原性鉴定
郭红, 房殿春, 中国人民解放军第三军医大学西南医院全军消化内科中心 重庆市 400038
郝嘉, 中国人民解放军第三军医大学新桥医院心外科 重庆市 400037
吴超, 中国人民解放军第三军医大学临床微生物及免疫教研室 重庆市 400038
郭红, 女, 1971-11-22生, 湖南省湘潭市人, 汉族, 2001年第三军医大学硕士, 主治医师, 讲师, 主要从事消化道肿瘤免疫防治方面的研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目 , No. 30400208 .
通讯作者: 郭红, 400038, 重庆市沙坪坝区高滩岩西南医院, 中国人民解放军第三军医大学西南医院全军消化内科中心. haoguo11@yahoo.com
电话: 023-66930172
收稿日期: 2005-08-29
修回日期: 2005-09-10
接受日期: 2005-10-11
在线出版日期: 2005-11-28
修回日期: 2005-09-10
接受日期: 2005-10-11
在线出版日期: 2005-11-28
Abstract
目的: 设计人端粒酶逆转录酶(hTERT)的新型病毒样颗粒疫苗, 并鉴定其表达蛋白的免疫原性和疫苗转染效率 .
方法: 合成阳离子抗原肽K18P9, 同时将人粒细胞、巨噬细胞集落刺激因子(hGM-CSF)和hTERT的克隆入真核双表达载体pTCAE中, 再将多肽和核酸疫苗结合于同一疫苗颗粒, 并将其转染入真核细胞内, ELISA法和免疫印迹法检测hGM-CSF和hTERT的免疫原性, 同时评价疫苗的转染效率 .
结果: 酶切及测序结果证实已成功构建含hGM-CSF和hTERT的载体pTGH, 电镜等结果证实核酸被包装肽包裹形成病毒样颗粒, ELISA法和免疫印迹法证实疫苗在体外对真核细胞的转染效应以及hGM-CSF和hTERT的免疫原性, 与阳性对照DOTAP组比较, 疫苗转染效率约可达78.5% .
结论: 成功构建了具有免疫原性的hTERT肽-核酸病毒样颗粒疫苗 .
Keywords: 端粒酶逆转录酶; 病毒样颗粒疫苗; 细胞毒T淋巴细胞.