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世界华人消化杂志. 2005-10-15; 13(19): 2302-2305
Published online 2005-10-15. doi: 10.11569/wcjd.v13.i19.2302
Published online 2005-10-15. doi: 10.11569/wcjd.v13.i19.2302
生存素 siRNA 表达质粒对MGC-803 细胞增殖的影响
赵伟红, 郭俊明, 肖丙秀, 管忠, 肖东升, 宁波大学医学院 浙江省宁波市 315211
赵伟红, 女, 1966-07-12生, 浙江省东阳市人, 汉族, 1989年浙江医科大学学士, 2004年浙江大学医学院医学硕士, 主要从事消化系统肿瘤研究.
基金项目: 浙江省医药卫生科学研究基金资助项目 , No. 2004A079 ; 宁波市青年博士基金资助项目 , No. 2004A62000 .
通讯作者: 郭俊明, 315211, 浙江省宁波市风华路818号, 宁波大学医学院. junmingguo@yahoo.com
电话: 0574-87600761 传真: 0574-87608638
收稿日期: 2005-07-28
修回日期: 2005-08-03
接受日期: 2005-08-06
在线出版日期: 2005-10-15
修回日期: 2005-08-03
接受日期: 2005-08-06
在线出版日期: 2005-10-15
Abstract
目的: 应用siRNA表达载体介导的RNAi技术, 观察RNA干扰沉默生存素基因对胃癌MGC-803细胞增殖的影响.
方法: 用脂质体介导将生存素siRNA表达质粒转染MGC-803细胞, 通过倒置显微镜观察转染后细胞形态学的变化, 四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性, 流式细胞术分析细胞周期的变化, 逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测生存素 mRNA的表达水平.
结果: 生存素siRNA表达质粒转染组MGC-803细胞变圆、浮起, 生存素siRNA表达质粒明显下调MGC-803细胞内生存素mRNA的表达, 与空白对照组相比降低了48.2%, 阻断细胞周期在G1期(77.4%), 显著抑制细胞增殖, siRNA转染组细胞吸光度比空白组显著降低(24 h: 0.272±0.048 vs 0.576±0.018; 48 h: 0.270±0.060 vs 0.809±0.027; 72 h: 0.143±0.046 vs1.015±0.075; 均P<0.01). 转染24、48和72 h后的抑制率分别为53.4%、66.7%和86.3%.
结论: 应用siRNA表达载体介导的RNAi技术, 可有效下调生存素在MGC-803细胞中的表达, 并在体外抑制细胞的增殖.
Keywords: 生存素; RNA干扰; 细胞周期; 细胞增殖