奥曲肽对大鼠肝星状细胞胞质内游离钙及细胞增殖的影响

Abstract

目的: 探讨在常氧和低氧条件下奥曲肽(octreotide)对大鼠肝星状细胞(HSC)胞内游离钙 [Ca²⁺]ｉ及增殖的调节.

方法: 采用钙荧光探针(Fura-2/AM)负载培养的大鼠HSC, 观察常氧和低氧条件下培养48 h 后octreotide对HSC [Ca²⁺]ｉ的调节, 同时用四唑盐(MTT)比色法比较不同浓度的octreotide对大鼠HSC增殖的影响.环磷酸腺苷(cAMP)和环磷酸鸟苷(cGMP)放免分析药盒测cAMP, cGMP浓度.

结果: 与常氧条件相比, 低氧条件下HSC [Ca²⁺]ｉ显著升高(293.2±12.4 nmol/L vs 137.7±7.8 nmol/L, P<0.01).500、800和1 000 μg/L octreotide在常氧状态下可引起HSCs [Ca²⁺]ｉ降低(P<0.05), 其值分别为92.5±2.5、83.8±2.3和76.6±2.2 nmol/L.低氧时500,800和1 000 μg/L octreotide可引起HSCs[Ca²⁺]ｉ降低(P<0.01), 其值分别为204.3±7.4、174.1±4.8和156.6±6.6 nmol/L.常氧对照组Ａ值(0.232±0.016)明显低于低氧对照组(0.533±0.036 )(P<0.01); 经500、800和1 000 μg/L octreotide处理后, 无论是常氧还是低氧状态下Ａ值均明显降低(P<0.01).低氧条件下cAMP和cGMP含量不发生改变(P>0.05); 无论是常氧还是低氧状态, 经过octreotide 500 μg/L处理后, cAMP和cGMP含量与相应对照组相比增高(cAMP: 1.69±0.18 pmol/mg vs 1.10±0.32 pmol/mg, 1.87±0.30 pmol/mg vs 1.37±0.25 pmol/mg, P<0.05; cGMP: 1.08±0.24 pmol/mg vs 0.86±0.12 pmol/mg, 1.17±0.53 pmol/mg vs 0.89±0.20 pmol/mg, P<0.05), 而Octreotide 800, 1 000 μg/L组更高(cAMP: 1.99±0.27, 2.48±0.37 pmol/mg vs 1.10±0.32 pmol/mg, P<0.01; 2.09±0.35, 2.24±0.15 pmol/mg vs 1.37±0.25 pmol/mg, P<0.01; cGMP: 1.24±0.17, 1.31±0.29 pmol/mg vs 0.86±0.12 pmol/mg, P<0.01; 1.38±0.29, 1.46±0.35 pmol/mg vs 0.89±0.20 pmol/mg, P<0.01).

结论: 缺氧可通过第二信使系统促进HSC的增生, 而octreotide无论常氧还是低氧条件下剂量依赖性抑制HSCs增殖; cAMP, cGMP参与了对HSC的调节.

Keywords: 奥曲肽; 钙; 肝; 星状细胞; 大鼠; cAMP; cGMP