Published online 2005-07-28. doi: 10.11569/wcjd.v13.i14.1652
修回日期: 2005-05-04
接受日期: 2005-05-14
在线出版日期: 2005-07-28
目的: 探讨人胃癌细胞系AGS中12-脂肪氧化酶(12-lipoxygenase, 12-LOX)的表达情况及其抑制剂黄芩甙元(baicalein)对AGS细胞增殖的影响.
方法: AGS在含100 mL/L小牛血清＋100 kU/L青、链霉素的RPMI1640培养基中常规培养. 用RT-PCR检测12-LOX在AGS中的表达情况, 分别以20, 40, 80 mmol/L baicalein干预细胞, 用四氮唑蓝(thiazolyl blue tetrazolium bromide, MTT)法在24, 48, 72 h测量细胞吸光度, 检测baicalein对细胞增殖的影响; 用倒置显微镜和电子显微镜进行形态观察; 通过脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)和吖啶橙-溴化乙锭(AO-EB)染色法检测细胞凋亡指数.
结果: AGS细胞中存在12-LOXmRNA表达;MTT显示baicalein大致呈时间、剂量依赖性抑制细胞增殖(各组间P<0.01, 除外40mmol/L 24 h组与48 h组);AGS细胞存活率最高为82.1%, 最低为38.4%. 倒置显微镜下可见baicalein干预后的细胞皱缩, 部分细胞胞体变圆, 脱离贴壁状态, 成为悬浮细胞; 电镜下可见baicalein干预后的细胞出现了凋亡的特征性改变: 核染色质边集及凋亡小体形成; AO-EB染色法显示除0 mmol/L组不同时间点细胞凋亡指数无显著差异外(P>0.05), 其余各干预组细胞凋亡指数均有显著差异(P<0.01); TUNEL染色法显示48 h时, baicalein 80 mmol/L细胞调亡指数为38.37±0.36%而0 mmol/L组细胞调亡指数为7.27±0.21%, 两组间存在显著差异(P<0.01).
结论: 人胃癌细胞AGS中存在12-LOXmRNA表达, 其特异性抑制剂baicalein能抑制AGS细胞增殖并促进其凋亡.