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世界华人消化杂志. 2005-05-15; 13(10): 1194-1197
Published online 2005-05-15. doi: 10.11569/wcjd.v13.i10.1194
Published online 2005-05-15. doi: 10.11569/wcjd.v13.i10.1194
过氧化氢诱导体外培养的人脾细胞凋亡
韩钧凌, 蔡德鸿, 张桦, 孙佳, 陈宏, 刘宏, 南方医科大学第二附属医院内分泌科 广东省广州市 510280
韩钧凌, 男, 1977-03-19, 河南省禹州市人, 汉族, 2002年第一军医大学硕士生.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目 , No. 30470829 .
通讯作者: 蔡德鸿, 510280, 广东省广州市工业大道中253号, 南方医科大学第二附属医院内分泌科. jimzhua@163.com
电话: 020-61643195
收稿日期: 2005-01-24
修回日期: 2005-02-15
接受日期: 2005-02-26
在线出版日期: 2005-05-15
修回日期: 2005-02-15
接受日期: 2005-02-26
在线出版日期: 2005-05-15
Abstract
目的: 研究过氧化氢(H2O2)对人脾细胞影响的时效和量效关系, 以获得稳定的人脾细胞凋亡模型.
方法: 采用研磨法获得悬浮的人脾细胞, 将细胞分组后给予相应的生理盐水或不同浓度的H2O2处理.运用四唑盐(MTT)比色法检测线粒体功能, 将细胞与Annexin Ⅴ-FITC/PI混合孵育后使用流式细胞仪检测早期凋亡细胞.
结果: 人脾细胞线粒体功能及凋亡率与H2O2呈剂量-效应关系, 随着H2O2浓度的增高, 线粒体功能逐渐降低, 而凋亡率则随H2O2浓度的增高而增加.同时它们与H2O2处理时间也存在时间－效应的关系.各处理组间细胞总凋亡率分别为55.01±9.11% (100 μmol/L), 44.07±9.00%(50 μmol/L), 30.20±6.75%(25 μmol/L)和9.97±1.68%(对照组)存在显著差异(P<0.05), 以H2O2 100 μmol/L处理的细胞组于6 h达到凋亡高峰(69.28±3.01)%.
结论: H2O2可以诱导体外培养的人脾细胞凋亡, 建立人脾细胞凋亡模型.
Keywords: 过氧化氢; 人脾细胞; 凋亡