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反义IGF-I寡核苷酸转染对人肝癌细胞生长的抑制作用
王季堃, 辽宁省锦州医学院附属第一医院肿瘤诊治中心 辽宁省锦州市 121000
乔世峰, 北京市铁路总医院普外科 北京市 100038
基金项目: 辽宁省教委项目 , No. 200071172 .
通讯作者: 王季堃, 121000, 辽宁省锦州市人民街5段2号, 锦州医学院附属第一医院肿瘤科. wangjik@sohu.com
电话: 0416-8999766
收稿日期: 2004-01-15
修回日期: 2004-03-20
接受日期: 2004-04-05
在线出版日期: 2004-08-15
修回日期: 2004-03-20
接受日期: 2004-04-05
在线出版日期: 2004-08-15
Abstract
目的: 利用反义核酸技术, 研究体外胰岛素样生长因子-I(IGF-I)反义寡核苷酸转染对肝癌细胞增生、分化及凋亡的影响, 探讨寡核苷酸转染治疗肝癌的可行性.
方法: 合成针对IGF-I的寡核苷酸片段, 利用脂质体包裹反义IGF-I寡核苷酸片段瞬时转染人肝癌细胞系BEL-7402细胞, MTT法检测细胞增生; 放免法检测培养细胞上清中AFP, CEA的分泌量; 免疫组化法检测转染细胞AFP, PCNA表达的变化; 采用末端标记(Tunel)法检测细胞凋亡的变化.
结果: MTT法检测转染反义IGF-I寡核苷酸的人肝癌细胞系BEL-7402 A值由0.44±0.09下降为0.30±0.07 (P<0.01), 上清液AFP和CEA水平分别由12.5±2.2 μg/L和6.8±2.3 μg/L下降为2.5±0.3 μg/L和2.2±1.5 μg/L(P<0.01, P<0.05), 凋亡阳性细胞数由16.4%±2.3%增加至23.1%±3.7%(P<0.05).
结论: 反义IGF-I寡核苷酸转染人肝癌细胞系BEL-7402细胞可以降低细胞增生, 减少细胞去分化并诱导肝癌细胞凋亡.
Keywords: N/A