研究快报
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世界华人消化杂志. 2004-07-15; 12(7): 1701-1704
Published online 2004-07-15. doi: 10.11569/wcjd.v12.i7.1701
酵母双杂交技术筛选HCV F蛋白结合蛋白基因
黄燕萍, 成军, 王琳, 杨倩, 杨瑗, 白桂芹, 刘敏, 张树林
黄燕萍, 成军, 王琳, 杨倩, 杨瑗, 白桂芹, 刘敏, 中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心, 全军病毒性肝炎防治研究重点实验室 北京市 100039
张树林, 西安交通大学第一医院传染科 陕西省西安市 710061
基金项目: 国家自然科学基金攻关项目, No. C03011402, No. C30070689; 军队"九、五"科技攻关项目, No. 98D063; 军队回国留学人员启动基金项目, No. 98H038; 军队"十、五"科技攻关青年基金项目, No. 01Q138; 军队"十、五"科技攻关面上项目, No. 01MB135.
通讯作者: 成军, 100039, 北京市西四环中路100号, 中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心, 全军病毒性肝炎防治研究重点实验室. cj@genetherapy.com.cn
电话: 010-66933391 传真: 010-63801283
收稿日期: 2004-03-15
修回日期: 2004-04-01
接受日期: 2004-05-11
在线出版日期: 2004-07-15
Abstract

目的: 丙型肝炎病毒(HCV)F蛋白是一个新的HCV基因产物, 其生物学特性目前尚不明确, 我们应用酵母双杂交系统Ⅲ技术进行筛选F蛋白结合蛋白基因.

方法: 构建F蛋白诱饵质粒, 转化酵母AH109后与含肝细胞cDNA文库质粒的酵母Y187进行配合, 在涂有X--gal营养缺陷型培养基(SD/-Trp-Leu-His-Ade)上筛选生长. 挑选蓝色克隆, 提取此酵母克隆的质粒, 转化大肠杆菌提取质粒DNA后测序, 进行生物信息学分析.

结果: 筛选出36个与F蛋白特异性相互作用的克隆, 其中11个为人类酶原颗粒蛋白, 5个锌指蛋白, 6个SL15蛋白, 2个过氧化物酶体离子蛋白酶, 1个补体调节蛋白因子, 2未知功能基因.

结论: 克隆到的基因对以后研究F蛋白的功能有一定提示作用.

Keywords: N/A