病毒性肝炎
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世界华人消化杂志. 2004-07-15; 12(7): 1555-1558
Published online 2004-07-15. doi: 10.11569/wcjd.v12.i7.1555
丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3上调硫氧还蛋白还原酶1基因的表达
纪冬, 成军, 郭江, 董菁, 王建军, 刘妍
纪冬, 成军, 郭江, 董菁, 王建军, 刘妍, 中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心、全军病毒性肝炎防治研究重点实验室 北京市 100039
纪冬, 男, 1975-12-05生, 河北省怀来县人, 汉族, 2002年解放军军医进修学院传染病学硕士生, 医师, 从事病毒性肝炎的临床治疗及实验研究.
基金项目: 国家自然科学基金攻关项目, No. C03011402, No. C30070689; 军队九五科技攻关项目, No. 98D063; 军队回国留学人员启动基金项目, No. 98H038; 军队十五科技攻关青年基金项目, No. 01Q138; 军队十五科技攻关项目, No. 01MB135.
通讯作者: 成军, 100039, 北京市西四环中路100号, 中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心、全军病毒性肝炎防治研究重点实验室. cj@genetherapy.com.cn
电话: 010-66933391 传真: 010-63801283
收稿日期: 2004-03-26
修回日期: 2004-04-10
接受日期: 2004-05-11
在线出版日期: 2004-07-15
Abstract

目的: 探讨丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白NS3对硫氧还蛋白还原酶1(TXNRD1)启动子转录的激活作用.

方法: 以HCV非结构蛋白NS3反式调节基因的基因表达谱芯片结果为基础, 利用生物信息学技术确定TXNRD1的启动子区域(TXNRD1p), 聚合酶链反应(PCR)扩增TXNRD1p, 克隆至真核报告载体pCAT3-Basic中, 构建pCAT3-TXNRD1p报告载体; 以该质粒转染肝癌细胞系HepG2细胞系, 用酶联免疫黏附法(ELISA)检测氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性; 并与pcDNA3.1(-)-NS3共转染HepG2细胞系, 用ELISA法检测CAT的表达活性.

结果: 成功获得TXNRD1启动子的正确克隆. pCAT3-TXNRD1p和pcDNA3.1(-)-NS3瞬时转染的HepG2细胞的CAT表达活性是pCAT3-Basic空载体的9.0倍, pCAT3-TXNRD1p的2.0倍, 进一步验证了利用基因表达谱技术研究HCV NS3蛋白反式激活作用的结果.

结论: TXNRD1启动子有顺式激活下游基因的活性; HCV的NS3蛋白具有对TXNRD1的反式激活作用.

Keywords: N/A