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survivin反义寡核苷酸对肝癌细胞生长抑制作用的研究
陈涛, 贾玉容, 赵铁军, 尹致良, 中国人民解放军成都军区总医院全军普通外科中心 四川省成都市 610083
陈涛, 男, 1970-11-05生, 四川省成都市人, 汉族. 2002年获第三军医大学普通外科博士学位, 主治医师. 主要从事肝脏、胆道外科研究.
通讯作者: 陈涛, 610083, 四川省成都市, 中国人民解放军成都军区总医院全军普通外科中心.
电话: 028-86570353
收稿日期: 2004-01-15
修回日期: 2004-02-10
接受日期: 2004-02-24
在线出版日期: 2004-07-15
修回日期: 2004-02-10
接受日期: 2004-02-24
在线出版日期: 2004-07-15
Abstract
目的: 采用反义寡核苷酸封闭肝癌细胞中survivin基因的表达, 研究其对肝癌细胞生长的抑制作用.
方法: 针对survivin mRNA翻译起始位点设计并合成反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide, ASODN); 采用脂质体介导survivin ASODN转染人肝癌细胞株SMMC-7721细胞, western-blot及原位杂交方法检测survivin蛋白及mRNA表达, 流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化, 检测转染前后细胞贴壁率及细胞生长抑制率变化, 绘制细胞生长曲线.
结果: 脂质体介导survivin反义寡核苷酸转染肝癌细胞后survivin蛋白及 mRNA表达分别从69.59及75.61降低至10.71及22.94, 细胞贴壁率从90.68%降低至33.16%, 细胞凋亡率从0.7%增加至31.35%, 均有显著差异. 转染后对细胞生长的抑制作用可以维持大约1 wk, 在转染后第3 d抑制率最高可达71.8%.
结论: 脂质体介导转染survivin反义寡核苷酸可以有效降低细胞内survivin基因的表达, 诱导细胞发生凋亡, 抑制肝癌细胞生长.
Keywords: N/A