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TNF-α影响肠黏膜上皮细胞间紧密连接蛋白的表达
宋红丽, 吕飒, 马力, 李颖, 刘沛, 中国医科大学附属第二医院感染科 辽宁省沈阳市 110004
宋红丽, 女, 1963-11-27生, 辽宁省大连市人, 汉族, 主任医师. 1998年大连医科大学硕士研究生, 2002年中国医科大学博士生, 主要从事感染病的临床和科研工作, 发表论文10篇.
基金项目: 卫生部临床重点项目 , No. 97100252 .
通讯作者: 刘沛, 110004, 沈阳市和平区三好街36号, 中国医科大学附属第二医院感染科. syliupei2003@yahoo.com.cn
电话: 024-83956962 传真: 024-83956451
收稿日期: 2004-02-27
修回日期: 2004-03-09
接受日期: 2004-03-16
在线出版日期: 2004-06-15
修回日期: 2004-03-09
接受日期: 2004-03-16
在线出版日期: 2004-06-15
Abstract
目的: 探讨肿瘤坏死因子(TNF-α)对肠黏膜上皮细胞间紧密连接的影响.
方法: 应用免疫荧光方法检测在肿瘤坏死因子(TNF-α) 0, 50, 100和200 mg/L作用下, 与结肠癌上皮细胞株(CaCo-2细胞株)共同培养24 h, 以及用TNF-α 100 mg/L与CaCo-2细胞共同培养0, 4, 8和24 h, 观察TNF-α对紧密连接蛋白(zonula occluden 1, ZO-1)表达的影响. 并应用半定量RT-PCR方法检测TNF-α用上述相应的时间和浓度作用后对肠黏膜上皮细胞ZO-1 mRNA表达的影响.
结果: 用TNF-α 100和200 mg/L作用24 h后ZO-1的免疫荧光明显减少, 并呈剂量依赖性; 用TNF-α 100 mg/L作用 24 h时ZO-1免疫荧光明显减少, 并呈时间依赖性. 应用半定量RT-PCR的方法检测结果: TNF-α作用24 h时, ZO-1 mRNA从TNF-α 0 mg/L 的1.1926降至 100 mg/L 的0.7834和200 mg/L 的0.7081; TNF-α 100 mg/L作用4 h, ZO-1mRNA为(95. 5±5.5%); 8 h为(82.0±5.4%); 24 h降至最低为(67.7±5.7%), 与对照组相比P<0.01.
结论: TNF-α是通过抑制肠上皮细胞间紧密连接蛋白ZO-1表达引起肠黏膜上皮细胞间紧密连接破坏. 并且是通过抑制ZO-1 mRNA引起肠上皮细胞ZO-1蛋白表达降低.
Keywords: N/A