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幽门螺杆菌vacA毒性片段与hpaA融合基因的原核表达
刘淼, 杨致邦, 林珊珊, 吴利先, 重庆医科大学基础医学院微生物学教研室 重庆市 400016
刘淼, 男, 1976-11生, 安徽人, 汉族, 硕士生, 主要从事机会致病菌感染研究.
通讯作者: 杨致邦, 400016, 重庆市, 重庆医科大学基础医学院微生物学教研室. dryangfm365@sina.com
电话: 023-68485090 传真: 023-68486859
收稿日期: 2003-10-27
修回日期: 2003-12-09
接受日期: 2003-12-22
在线出版日期: 2004-05-15
修回日期: 2003-12-09
接受日期: 2003-12-22
在线出版日期: 2004-05-15
Abstract
目的: 构建幽门螺杆菌vacA毒性片段(v)与hpaA融合基因的原核表达载体, 并诱导表达, 为制备具有治疗与预防作用的疫苗奠定基础.
方法: 通过设计带有编码IL-3N端12个氨基酸引物, 用PCR技术从pQE30-V质粒扩增出有接头的v基因, 克隆至质粒pTrc99A-HpaA中与hpaA融合. 将融合基因插入原核表达载体pQE30, 再将pQE30-V-HpaA转化大肠杆菌DH5a, 经IPTG 诱导表达, SDS-PAGE分析表达结果, Western blotting鉴定其抗原性.
结果: 融合蛋白的相对分子量约为65 000, 能与幽门螺杆菌感染的人阳性血清发生抗原抗体反应.
结论: 重组表达质粒pQE30-V-HpaA表达成功, 为进一步研究其免疫学活性及制备疫苗提供了材料.
Keywords: N/A