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BAK基因过表达对胃癌细胞的诱导凋亡作用及其分子机制
郑丽端, 华中科技大学同济医学院附属协和医院病理科 湖北省武汉市 430022
童强松, 汪良, 华中科技大学同济医学院附属协和医院外科 湖北省武汉市 430022
刘俊, 钱伟, 华中科技大学同济医学院附属协和医院消化内科 湖北省武汉市 430022
郑丽端, 女, 1973-10-11生, 福建省南安市人, 汉族. 1997年同济医科大学本科毕业, 2001级华中科技大学同济医学院在读硕士研究生, 主治医师. 主要从事消化系统疾病的分子病理研究.
通讯作者: 童强松, 430022, 湖北省武汉市, 华中科技大学同济医学院附属协和医院外科. qs_tong@hotmail.com
电话: 027-85726129
收稿日期: 2003-11-22
修回日期: 2003-12-09
接受日期: 2003-12-22
在线出版日期: 2004-05-15
修回日期: 2003-12-09
接受日期: 2003-12-22
在线出版日期: 2004-05-15
Abstract
目的: 探讨转染外源性BAK基因及其过表达对胃癌细胞的诱导凋亡作用和分子机制.
方法: 构建携带有BAK基因的真核表达载体并转染胃癌MKN-45细胞1-5 d后, RT-PCR和Western Blotting法检测BAK基因表达; 细胞计数、MTT比色法检测癌细胞生长活性, 流式细胞仪分析细胞周期时相改变, 透射电镜、末端TdT酶标记技术检测癌细胞凋亡;比色法检测癌细胞内Caspase-3活性改变.
结果: 转染1-5 d后, 癌细胞BAK mRNA和蛋白表达水平显著增强(P<0.01), 癌细胞体外生长抑制11.6-35.3% (P<0.01), 增生活性抑制10.2-32.4% (P<0.01), 细胞周期出现G0/G1期阻滞, 部分癌细胞出现胞体缩小、核固缩等凋亡形态学改变, 凋亡率为21.4%(P<0.01); 癌细胞Caspase-3活性增强4.45倍(P<0.01).
结论: 转染外源性BAK基因使其过表达能激活Caspase-3, 显著诱导胃癌MKN-45细胞凋亡, 有望成为胃癌治疗的新途径.
Keywords: N/A