病毒性肝炎
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世界华人消化杂志. 2004-03-15; 12(3): 614-617
Published online 2004-03-15. doi: 10.11569/wcjd.v12.i3.614
乙肝病毒X基因真核表达载体的构建及人肝细胞株HL-7702转染
陈红英, 唐南洪, 张生君, 陈治新, 王小众
陈红英, 张生君, 陈治新, 王小众, 福建医科大学附属协和医院消化内科 福建省福州市 350001
唐南洪, 福建医科大学附属协和医院肝胆外科 福建省福州市 350001
陈红英, 女, 1975-12-04生, 福建省漳州市人, 汉族, 2001年福建医科大学协和医院消化内科硕士生, 主要从事肝脏疾病研究.
通讯作者: 王小众, 350001, 福建省福州市, 福建医科大学附属协和医院消化内科. drwangxz@pub6.fz.fj.cn
电话: 0591-3357896-8482
收稿日期: 2003-10-31
修回日期: 2003-11-05
接受日期: 2003-12-08
在线出版日期: 2004-03-15
Abstract

目的: 构建表达乙肝病毒(HBV)X基因的人肝细胞株.

方法: 用PCR法扩增HBV X基因序列, 将其添A后连至PUCmT载体上, 用Ecol I和Hind III双酶切PUCmT-X和PcDNA3载体, 连接酶切片段PcDNA3及X片段以构建重组质粒PcDNA3-X. 用脂质体转染法将PcDNA3-X及空质粒PcDNA3导入肝细胞HL-7702中, G418选择培养, RT-PCR鉴定其稳定表达.

结果: 已构建的PcDNA3-X经序列测定含有完整的HBV X基因片段, 转入HL-7702细胞后经RT-PCR证实该细胞有稳定表达X蛋白.

结论: 成功构建了表达HBV X基因的肝细胞株, 为进一步探讨HBV X 基因在肝炎与肝癌发生中的作用提供了理想的实验模型.

Keywords: N/A