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3种富集胃癌患者外周血中胃癌细胞方法的比较
陈健, 郭俊明, 金之瑾, 肖丙秀, 宁波大学医学院 浙江省宁波市 315211
基金项目: 浙江省医药卫生科研基金资助项目 , No. 2002A073 ; 宁波市重点博士基金资助项目 , No. 02J20101-07 ; 宁波大学重点科研项目 , No. z0214015 .
通讯作者: 郭俊明, 315211, 浙江省宁波市镇宁西路1211号, 宁波大学医学院. junmingguo@yahoo.com
电话: 0574-87600758 传真: 0574-87608638
收稿日期: 2003-08-07
修回日期: 2003-08-25
接受日期: 2003-09-18
在线出版日期: 2004-02-15
修回日期: 2003-08-25
接受日期: 2003-09-18
在线出版日期: 2004-02-15
Abstract
目的: 建立一种富集胃癌患者外周血中癌细胞的有效方法.
方法: 先将不同浓度胃癌MGC-803细胞加入到健康人外周血中, 再用淋巴细胞分离液收集单核细胞, 然后等分成3份, 并用3种方法处理-A方法, 用CD45磁珠去除白细胞; B方法, 用Ber-EP4磁珠富集癌细胞; C方法, 先后使用上述2磁珠. 最后用定量RT-PCR检测看家基因β2微球蛋白(β2MG)mRNA的量. 同法检测30例胃癌患者外周血.
结果: β2MG mRNA扩增曲线的交叉点(crossing point, Cp)数值与癌细胞数间有良好的负相关(方法A, P<0.05, 方法B或C, P<0.01). 方法C检测到的Cp值为3种方法中最大的; 其灵敏度为1 mL血中含有1个癌细胞. 用A、B和C方法检测30例胃癌患者外周血癌细胞的阳性率分别为70.00%, 60.00%和36.57%(C与A比较, χ2 = 5.79, P<0.05; C与B比较, χ2 = 4.92, P<0.05).
结论: 在检测胃癌患者外周血癌细胞的实验中, 联用阴性和阳性免疫磁珠可减少来自外周血白细胞的污染.
Keywords: N/A