病毒性肝炎
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世界华人消化杂志. 2004-02-15; 12(2): 332-335
Published online 2004-02-15. doi: 10.11569/wcjd.v12.i2.332
多对型特异性引物巢式PCR检测湖南省乙肝病毒基因型
温志立, 谭德明
温志立, 谭德明, 中南大学湘雅医院传染科 湖南省长沙市 410008
温志立, 男, 1972-06-16生, 江西省吉安市人, 汉族. 2001年湖南医科大学病原生物学硕士, 现为中南大学湘雅医院传染病学博士生. 主要从事病毒性肝炎的分子生物学研究.
通讯作者: 温志立, 410008, 湖南省长沙市湘雅路141号, 中南大学湘雅医院传染科. zhiliwen@sina.com
电话: 0731-4362611
收稿日期: 2003-08-08
修回日期: 2003-08-10
接受日期: 2003-09-24
在线出版日期: 2004-02-15
Abstract

目的: 采用多对型特异性引物, 通过巢式PCR法检测湖南省乙肝患者血清中乙型肝炎病毒(HBV)基因型的分布情况.

方法: 根据从前S1基因到S基因中的保守序列设计出10条内外引物, 并将其中8条内引物分成A、B两组, 分别扩增A、B、C和D、E、F型HBV, 然后将第2轮PCR的两组产物分别用3%琼脂糖进行电泳, 根据PCR产物片断大小直接判定HBV基因型. 与目前常用的PCR-RFLP法进行了比较, 并做重复试验以证实该方法的可靠性和准确性. 用此法检测了220例湖南籍慢性乙肝血清中的HBV基因型, 以了解湖南人群的HBV基因型分布情况.

结果: 多对型特异性引物巢式PCR与PCR-RFLP法的检测结果完全一致, 重现率(100%); 湖南人群HBV基因分型结果为B型190例(86.4%)、C型30例(13.6%).

结论: 这种新的巢式PCR分型法能清晰直观地辨别HBV基因型, 结果准确可靠. 用此法证实了湖南人群的HBV优势基因型以B型为主, C型次之.

Keywords: N/A