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世界华人消化杂志. 2004-12-15; 12(12): 2886-2890
Published online 2004-12-15. doi: 10.11569/wcjd.v12.i12.2886
Published online 2004-12-15. doi: 10.11569/wcjd.v12.i12.2886
应用表达谱芯片技术筛选HBcAg反式调节基因
徐志强, 成军, 张鸿飞, 王建军, 刘妍, 纪冬, 中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心, 全军病毒性肝炎防治研究重点实验室感染三科 北京市 100039
基金项目: 国家自然科学基金攻关项目 , No. C03011402, No. C30070689, 军队"九、五"科技攻关项目, No. 98D063, 军队回国留学人员启动基金项目, No. 98H038, 军队"十、五"科技攻关青年基金项目, No. 01Q138, 军队"十、五"科技攻关面上项目, No. 01MB135
通讯作者: 成军, 100039, 北京市西四环中路100号, 中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心, 全军病毒性肝炎防治研究重点实验室感染三科. cj@genetherapy.com.cn
电话: 010-66933391 传真: 010-63801283
收稿日期: 2004-05-28
修回日期: 2004-09-13
接受日期: 2004-09-30
在线出版日期: 2004-12-15
修回日期: 2004-09-13
接受日期: 2004-09-30
在线出版日期: 2004-12-15
Abstract
目的: 筛选与克隆HBcAg激活基因, 了解其在体内的调节功能线索及机制.
方法: 以分子生物学技术构建HBcAg的真核表达载体pcDNA3.1(-)-HBcAg, 以表达质粒pcDNA3.1(-)-HBcAg转染HepG2细胞, 以空载体pcDNA3.1(-)为平行对照, 制备转染后的细胞裂解液, 提取mRNA. 应用基因表达谱芯片技术对差异表达mRNA进行检测和分析.
结果: HBcAg表达质粒pcDNA3.1(-)-HBcAg经酶切鉴定和DNA测序鉴定正确. 经基因表达谱芯片分析, 29种基因的表达水平上调, 17种基因的表达水平下调.
结论: 筛选到一些与细胞内信号传导、免疫调节、细胞凋亡、蛋白质翻译合成、肿瘤发生相关的HBcAg反式调节的靶基因.
Keywords: N/A