病毒性肝炎
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世界华人消化杂志. 2004-12-15; 12(12): 2801-2804
Published online 2004-12-15. doi: 10.11569/wcjd.v12.i12.2801
噬菌体展示技术筛选HBV前-前-S抗原基因启动子结合蛋白基因
黄燕萍, 成军, 张树林, 杨艳杰, 高学松, 钟彦伟, 杨瑗, 白桂芹, 蔺淑梅
黄燕萍, 成军, 杨艳杰, 高学松, 钟彦伟, 杨瑗, 白桂芹, 蔺淑梅, 中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心, 全军病毒性肝炎防治研究重点实验室 北京市 100039
张树林, 西安交通大学第一医院传染科 陕西省西安市 710061
黄燕萍, 女, 1963-04-23生, 陕西省西安市人, 汉族, 2002年西安交通大学内科学博士研究生, 副教授. 主要从事传染病的临床与基础研究.
基金项目: 国家自然科学基金攻关项目, No. C03011402, No. C30070689; 军队九五科技攻关项目, No. 98D063; 军队回国留学人员启动基金项目, No. 98H038; 军队十五科技攻关青年基金项目, No. 01Q138; 军队十五科技攻关面上项目, No. 01MB135
通讯作者: 成军, 100039, 北京市西四环中路100号, 中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心, 全军病毒性肝炎防治研究重点实验室. cj@genetherapy.com.cn
电话: 010-66933391 传真: 010-63801283
收稿日期: 2004-05-28
修回日期: 2004-09-13
接受日期: 2004-09-30
在线出版日期: 2004-12-15
Abstract

目的: 筛选乙型肝炎病毒(HBV)前-前-S抗原基因启动子的结合蛋白.

方法: 应用噬菌体表面展示技术, 以HBV前-前-S抗原基因启动子的聚合酶链反应产物作为固相筛选分子, 对噬菌体人肝细胞cDNA文库进行4轮"黏附-洗脱-扩增"的筛选过程, 经噬斑的PCR扩增后, 构建克隆载体, 并对所筛选克隆进行DNA测序和生物信息学分析.

结果: 噬菌体经富集后, 从随机筛选的43个克隆中得到20个与HBV前-前-S抗原基因启动子特异结合的阳性克隆, 包括人类SMG-1的磷脂酰肌醇3相关激酶激酶、28 S核糖体、单倍型As2A线粒体、组氨酰-tRNA合成酶、脂肪醛脱氢酶、桥粒相关蛋白、MAX相互作用蛋白1等17个已知功能基因及3个未知功能基因.

结论: 用噬菌体人肝细胞cDNA文库筛选得到HBV前-前-S抗原基因启动子的结合蛋白基因, 为进一步研究HBV发病机制创造了新的途径.

Keywords: N/A