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世界华人消化杂志. 2004-11-15; 12(11): 2749-2752
Published online 2004-11-15. doi: 10.11569/wcjd.v12.i11.2749
Published online 2004-11-15. doi: 10.11569/wcjd.v12.i11.2749
基因表达谱芯片技术筛选NS5ATP11反式调节基因
王琳, 成军, 中国人民解放军302医院传染病研究所基因治疗研究中心, 全军病毒性肝炎防治研究重点实验室 北京市 100039
基金项目: 国家自然科学基金攻关项目 , No. C03011402, No. C30070689 ; 军队"九、五"科技公关项目 , No. 98D063 ; 军队回国留学人员启动基金项目 , No. 98H038 ; 军队"十、五"科技面上项目 , No. 01MB135 .
通讯作者: 成军, 100039, 北京市西四环中路100号, 北京市中国人民解放军302医院传染病研究所基因治疗研究中心. cj@genetherapy.com.cn
电话: 010-66933392 传真: 010-63801283
收稿日期: 2004-05-28
修回日期: 2004-09-13
接受日期: 2004-09-30
在线出版日期: 2004-11-15
修回日期: 2004-09-13
接受日期: 2004-09-30
在线出版日期: 2004-11-15
Abstract
目的: 应用基因芯片技术研究未知功能基因NS5ATP11的表达对于肝细胞基因表达谱的影响.
方法: 从HepG2细胞RNA中用反转录聚合酶链反应法(RT-PCR)扩增出NS5ATP11编码区DNA, 常规分子生物学技术构建NS5ATP11的真核表达载体pcDNA3.1(-)-NS5ATP11, 利用脂质体转染技术转染HepG2细胞, NS5ATP11的表达以Western blot杂交技术证实. 从转染和非转染细胞HepG2种提取总mRNA, 逆转录为cDNA, 并进行基因芯片技术分析.
结果: 证实构建pcDNA3.1(-)-NS5ATP11在HepG2细胞中表达正确. NS5ATP11重组表达载体和空白载体转染的HepG2细胞的基因表达改变进行分析. 结果表明, 8种基因的表达水平上调, 10种基因的表达水平下调.
结论: NS5ATP11对于肝细胞基因表达谱存在一定影响; 基因芯片技术是分析蛋白反式调节基因表达谱的重要技术途径, 有助于了解NS5ATP11对肝细胞和其他生物学功能的调节作用.
Keywords: N/A