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世界华人消化杂志. 2004-11-15; 12(11): 2740-2742
Published online 2004-11-15. doi: 10.11569/wcjd.v12.i11.2740
Published online 2004-11-15. doi: 10.11569/wcjd.v12.i11.2740
抗肝癌人源化Diabody在大肠杆菌中的可溶性表达及活性鉴定
孙志伟, 王双, 俞炜源, 军事医学科学院生物工程研究所 北京市 10071
赵君, 刘彦仿, 中国人民解放军第四军医大学病理教研室 陕西省西安市 710032
基金项目: 国家自然科学基金资助 , No. 30171065 .
通讯作者: 孙志伟, 100071, 北京市军事医学科学院生物工程研究所蛋白质工程研究室. szwyhhh@263.net
电话: 010-66948819 传真: 010-63833521
收稿日期: 2004-08-30
修回日期: 2004-09-13
接受日期: 2004-10-11
在线出版日期: 2004-11-15
修回日期: 2004-09-13
接受日期: 2004-10-11
在线出版日期: 2004-11-15
Abstract
目的: 构建人源化抗肝癌双价抗体, 并实现其在大肠杆菌中的可溶性表达.
方法: 缩短人源化抗肝癌单链抗体hscFv25的连接肽为5肽, 构建(hscFv25)2基因, 克隆入原核表达载体后, 转化入大肠杆菌表达, 并纯化目的蛋白, 细胞ELISA、免疫组织化学法检测其生物活性.
结果: 目的基因在大肠杆菌中得到了可溶性表达, 纯化蛋白的相对亲和力比亲本抗体提高了10倍左右, 对肝癌组织切片的免疫组织化学染色呈强阳性, 阳性率为75%.
结论: 成功制备了人源化抗肝癌双价抗体, 该抗体具有较高的亲和力, 为进一步的临床研究奠定了基础.
Keywords: N/A