研究快报
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世界华人消化杂志. 2004-11-15; 12(11): 2733-2736
Published online 2004-11-15. doi: 10.11569/wcjd.v12.i11.2733
乙型肝炎病毒前-前-S蛋白结合蛋白新基因PPSBP9的克隆化
蔺淑梅, 成军, 张树林, 刘敏, 王琳, 黄燕萍, 杨瑗, 白桂琴
蔺淑梅, 张树林, 西安交通大学第一医院传染科 陕西省西安市 710061
成军, 刘敏, 王琳, 黄燕萍, 杨瑗, 白桂芹, 中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心, 全军病毒性肝炎防治研究重点实验室 北京市 100039
基金项目: 国家自然科学基金攻关项目, No. C03011402, No. C30070689; 军队"九、五"科技攻关项目, No. 98D063; 军队回国留学人员启动基金项目, No. 98H038; 军队"十、五"科技攻关青年基金项目, No. 01Q138; 军队"十、五"科技攻关面上项目, No. 01MB135.
通讯作者: 成军, 100039, 北京市西四环中路100号, 中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心, 全军病毒性肝炎防治研究重点实验室. cj@genetherapy.com.cn
电话: 010-66933391 传真: 010-63801283
收稿日期: 2004-05-28
修回日期: 2004-09-01
接受日期: 2004-09-30
在线出版日期: 2004-11-15
Abstract

目的: 研究乙型肝炎病毒前－前-S蛋白结合蛋白新基因PPSBP9的克隆化.

方法: 构建前-前-S的酵母细胞表达载体, 采用酵母双杂交系统筛选人肝细胞cDNA文库, 利用核苷酸数据库及生物信息学技术, 对于筛选结果进行分析. 发现其中有1个未知功能的新基因. 根据GenBank中的序列信息设计引物, 以HepG2细胞系cDNA文库为模板, 以逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术扩增获得该新基因的全长编码序列, 并经测序证实, 命名该新基因为PPSBP9并在GenBank中注册, 注册号为AY553877.

结果: PPSBP9基因的编码序列全长为840个核苷酸(nt), 编码产物由279个氨基酸残基(aa)组成. 经核苷酸序列数据库(GenBank)和蛋白质一级结构序列数据库(SwissProt)同源序列的搜寻, 与已知基因序列和蛋白序列之间没有显著同源性.

结论: 筛选并成功的克隆了乙型肝炎病毒前－前-S蛋白与肝细胞cDNA文库中结合蛋白新基因PPSBP9, 为进一步研究HBV前－前-S及其肝细胞结合蛋白新基因在HBV致病中的作用奠定了基础.

Keywords: N/A