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世界华人消化杂志. 2004-11-15; 12(11): 2623-2626
Published online 2004-11-15. doi: 10.11569/wcjd.v12.i11.2623
Published online 2004-11-15. doi: 10.11569/wcjd.v12.i11.2623
pcDNA3.1(+)-MCP-1和pcDNA3.1(+)-Gro α真核表达质粒的构建及鉴定
任玥欣, 宋于刚, 陈学清, 智发朝, 钟世顺, 南清振, 武金宝, 崔忠林, 广州南方医科大学南方医院消化疾病研究所 广东省广州市 510515
任玥欣, 女, 1974-12-09生, 山东省济南市人, 汉族. 2004年广州南方医科大学博士, 讲师, 主要从事胰腺疾病诊断及治疗研究.
基金项目: 国家自然科学基金项目 , No. 30370648 .
通讯作者: 宋于刚, 510515, 广东省广州市, 广州南方医科大学南方医院消化疾病研究所. drrren@tom.com
收稿日期: 2004-08-17
修回日期: 2004-09-13
接受日期: 2004-09-19
在线出版日期: 2004-11-15
修回日期: 2004-09-13
接受日期: 2004-09-19
在线出版日期: 2004-11-15
Abstract
目的: 构建并鉴定真核表达质粒pcDNA3.1(+)-MCP-1和pcDNA3.1(+)-Groα.
方法: 据GeneBank中大鼠MCP-1和Groα cDNA序列设计并合成引物, 提取急性胰腺炎模型大鼠总RNA, RT-PCR扩增, 并将扩增产物TA克隆至pGEM-T easy载体, 然后分别双酶切pGEM-MCP-1和pGEM-Groα回收目的片段再克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+).
结果: pcDNA3.1(+)-MCP-1和pcDNA3.1(+)-Groα真核表达质粒构建完成后, 用限制性内切酶、PCR及DNA序列分析等多种方法进行鉴定, 证实其构建成功.
结论: pcDNA3.1(+)-MCP-1和pcDNA3.1(+)-Groα真核表达质粒构建成功, 为进一步研究该真核表达质粒的免疫保护效果及制备急性胰腺炎pcDNA3.1(+)-MCP-1和pcDNA3.1(+)-GroαDNA疫苗奠定了基础.
Keywords: N/A