病毒性肝炎
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世界华人消化杂志. 2004-11-15; 12(11): 2581-2584
Published online 2004-11-15. doi: 10.11569/wcjd.v12.i11.2581
乙型肝炎病毒全S蛋白反式激活蛋白1基因的克隆化
白桂芹, 成军, 刘妍, 吴顺华, 蔺淑梅, 黄燕萍, 张树林
白桂芹, 成军, 刘妍, 吴顺华, 蔺淑梅, 黄燕萍, 中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心, 全军病毒性肝炎防治研究重点实验室 北京市 100039
张树林, 西安交通大学第一医院传染科 陕西省西安市 710061
白桂芹, 女, 1969-06-02, 陕西省西安市人, 汉族, 西安交通大学第一医院内科学博士, 主要从事病毒性肝炎的发病机制的研究.
基金项目: 国家自然科学基金攻关项目, No. C03011402, No. C30070689; 军队"九、五"科技攻关项目, No. 98D063; 军队回国留学人员启动基金项目, No. 98H038; 军队"十、五"科技攻关青年基金项目, No. 01Q138; 军队"十、五"科技攻关面上项目, No. 01MB135
通讯作者: 成军, 100039, 北京市西四环中路100号, 中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心, 全军病毒性肝炎防治研究重点实验室. cj@genetherapy.com.cn
电话: 010-66933392 传真: 010-63801283
收稿日期: 2004-05-28
修回日期: 2004-09-13
接受日期: 2004-09-30
在线出版日期: 2004-11-15
Abstract

目的: 应用抑制性消减杂交(SSH)技术及生物信息学(bioin-formatics)技术筛选并克隆乙型肝炎病毒(HBV)全S反式激活新型靶基因, 进一步阐明HBV感染相关疾病的发病机制.

方法: 以HBV全S蛋白表达质粒pcDNA3.1(-)-全S转染HepG2细胞, 以空载体pcDNA3.1(-)为平行对照, 提取mRNA逆转录为cDNA, 经RsaI酶切后将实验组cDNA分成2组, 分别与2种不同的接头衔接, 与对照组cDNA进行二次杂交和二次PCR. 并结合生物信息学技术, 克隆HBV全S反式激活作用的新型靶基因.

结果: 对于所获基因片段序列分析表明, 其中之一为新型基因片段. 成功克隆出他的全长序列并测序证实, 其可以被全S蛋白反式激活, 故命名为全S反式激活蛋白1(CSTP1), 已在GenBank中注册, 注册号: AY553877. CSTP1基因的编码序列全长为945个核苷酸(nt), 编码产物由315个氨基酸残基(aa)组成.

结论: HBV全S蛋白具有反式激活蛋白1基因克隆成功. HBV全S反式激活新靶基因的发现, 为进一步研究HBV全S的分子生物学机制和探索新型治疗技术奠定基础.

Keywords: N/A