研究快报
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世界华人消化杂志. 2004-10-15; 12(10): 2467-2469
Published online 2004-10-15. doi: 10.11569/wcjd.v12.i10.2467
RNAi重组体抑制胃癌细胞AGS中DNMT1基因的表达
陈道荣, 王丕龙, 黄爱龙
陈道荣, 王丕龙, 重庆医科大学附属第一医院消化内科 重庆市 400016
黄爱龙, 重庆医科大学病毒性肝炎研究所 重庆市 400010
通讯作者: 陈道荣, 400016, 重庆市友谊路1号, 重庆医科大学附属第一医院消化内科. cdrcdrcn@yahoo.com.cn
电话: 023-66828224,023-68122549
收稿日期: 2004-05-29
修回日期: 2004-06-02
接受日期: 2004-06-10
在线出版日期: 2004-10-15
Abstract

目的: 利用RNA干扰(RNA interfering, RNAi)技术, 以DNMT1(DNA methyltransferase 1)为靶基因, 设计构建重组体,研究其对胃癌细胞AGS中DNMT1表达的抑制作用.

方法: 设计有小发夹结构的两条DNA序列, 经退火成互补双链, 再克隆至载体pTZU6+1中构建重组体, 经鉴定正确后, 转染胃癌细胞AGS, 最后使用RT-PCR法定性分析DNMT1的mRNA水平和Western blot法分析DNMT1的蛋白表达水平.

结果: 成功地构建了靶向DNMT1 基因RNAi的重组体, 将其有效转染到胃癌细胞AGS中去后, 出现了DNMT1的蛋白和mRNA水平的明显下降,转染后48 h的相对抑制率为73%左右.

结论: DNMT1靶向RNA干扰重组体转染到胃癌细胞中可抑制DNMT1的表达.

Keywords: N/A