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原代猪肝细胞PERV检测及其意义
郭海涛, 王英杰, 刘鸿凌, 刘俊, 黄艳萍, 王宇明, 中国人民解放军第三军医大学西南医院全军感染病研究所 重庆市 400038
王海慧, 中国人民解放军第三军医大学西南医院内分泌科 重庆市 400038
郭海涛, 男, 1976-03-06生, 江苏省阜宁市人, 汉族. 感染病学硕士, 住院医师, 主要从事生物人工肝细胞材料方面研究.
基金项目: 国家自然科学专项基金资助项目 , No. 30027001 .
通讯作者: 王英杰, 400038, 重庆市沙坪坝高滩岩, 中国人民解放军第三军医大学西南医院全军感染病研究所. wangyj103@263.net
电话: 023-68754289
收稿日期: 2003-03-14
修回日期: 2003-03-20
接受日期: 2003-03-28
在线出版日期: 2004-01-15
修回日期: 2003-03-20
接受日期: 2003-03-28
在线出版日期: 2004-01-15
Abstract
目的: 探讨猪肝细胞内源性逆转录病毒(PERV)检测方法及意义.
方法: 采用体外二步灌流法获取猪肝细胞, 使用特异性引物对其前病毒序列进行观察; 以未逆转录PCR为对照, 采用RT-PCR方法检测原代猪肝细胞PERV携带及释放情况, 并用套式RT-PCR对扩增产物进行鉴定.
结果: 原代猪肝细胞基因组中可检测到PERV前病毒序列, 肝细胞中亦可检测到特异性的PERV RNA序列. 在缺乏有丝分裂原刺激的情况下, 猪肝细胞普通培养的不同时段均可检测到病毒释放, 并可持续至细胞死亡.
结论: 中国实验小型猪肝细胞携带PERV病毒序列, 猪肝细胞普通培养时可释放该病毒, 其感染性及生物安全性尚需进一步研究.
Keywords: N/A