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人源性大肠癌抗原基因的SEREX筛选
刘宇虎, 张振书, 钟东, 武金宝, 但汉雷, 赖卓胜, 王亚东, 张亚历, 肖冰, 中国人民解放军第一军医大学南方医院全军消化内科研究所 广东省广州市 510515
刘宇虎, 男, 1963-06-01生, 四川省越西县人, 博士生, 副主任医师.
基金项目: 国家自然科学基金项目 , No. 30171053
通讯作者: 张振书, 510515, 广东省广州市, 中国人民解放军第一军医大学南方医院全军消化内科研究所. zhangzs@fimmu.edu.cn
电话: 020-61641561
收稿日期: 2002-12-08
修回日期: 2002-12-18
接受日期: 2002-12-25
在线出版日期: 2003-09-15
修回日期: 2002-12-18
接受日期: 2002-12-25
在线出版日期: 2003-09-15
Abstract
目的
寻找人源性大肠癌相关抗原基因.
方法
构建3个以λTripl Ex2噬菌体作载体的大肠癌抗原cDNA表达文库, 用自体或异体大肠癌患者血清应用SEREX方法进行免疫筛选. 用平板法扩增阳性克隆噬菌体, 提取纯化DNA, 用Sfi I 酶切和PCR鉴定插入片段的大小.
结果
构建成3个大肠癌抗原cDNA噬菌体表达文库, 滴度分别为2.39×106 nfu/L, 2.07×106 nfu/L和1.86×106 nfu/L, 插入片段长度为0.5-4 kb, 平均分别为1.4 kb, 1.6 kb和1.3 kb. 筛选发现4个阳性克隆, 插入cDNA片段大小分别为 2.4 kb, 1.8 kb, 2.3 kb和2.2 kb.
结论
用SEREX方法筛选大肠癌抗原cDNA表达文库, 可获得有价值的大肠癌的重组抗原基因克隆, 将有利于大肠癌的早期诊断和重组疫苗的研究.
Keywords: N/A