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丙型肝炎病毒核心蛋白结合蛋白6上调新生多肽相关复合物α多肽基因的表达
杨倩, 刘妍, 成军, 李克, 王建军, 洪源, 中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心北京市 100039
杨倩, 女, 32岁, 广西桂平人, 博士研究生, 主要从事传染病临床与基础研究工作.
张树林, 西安交通大学第一医院传染科陕西省西安市 710061
基金项目: 国家自然科学基金攻关项目 , No. C03011402, No.C30070689 ; 军队"九、五"科技攻关项目 , No. 98D063 ; 军队回国留学人员启动基金项目 , No. 98H038 ; 军队"十、五"科技攻关青年基金项目 , No. 01Q138 ; 军队"十、五"科技攻关面上项目 , No. 01MB135 .
通讯作者: 成军, 100039, 北京市西四环中路100号, 中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心. cj@genetherapy.com.cn
电话: 010-66933391 传真: 010-63801283
收稿日期: 2003-01-11
修回日期: 2003-02-20
接受日期: 2003-03-21
在线出版日期: 2003-07-15
修回日期: 2003-02-20
接受日期: 2003-03-21
在线出版日期: 2003-07-15
Abstract
目的
探讨HCV核心蛋白结合蛋白6对新生多肽相关复合物α多肽启动子的激活作用．
方法
以基因表达谱芯片技术筛选HCBP6表达质粒转染HepG2细胞后的差异表达基因为基础, 利用生物信息学技术确定NACA的启动子区域(NACA-p), 聚合酶链反应(PCR)扩增NACA-p, 克隆至真核表达载体pCAT3中, 构建pCAT3-NACA-p表达载体; 以该质粒转染COS-7、NIH 3T3细胞系, 用酶联免疫黏附方法(ELISA)检测氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性; 与pcDNA3.1(-)-HCBP6共转染NIH 3T3细胞系, 用ELISA法检测CAT的表达活性．
结果: 质粒pCAT3-NACA-p在NIH 3T3、COS-7细胞中能够激活CAT的表达; 共转染实验中pCAT3-NACA-p+pcDNA3.1(-)-HCBP6组CAT的表达活性是pCAT3-NACA-p的4倍．
结论: pCAT3-NACA-p具有启动子活性; HCV核心蛋白结合蛋白6对NACA-p有激活作用．本研究为探讨HCV核心蛋白结合蛋白6的功能提供新的实验及理论基础．
Keywords: N/A