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环氧合酶-2反义核酸对人胆管癌细胞增生的影响
吴高松, 武小勇, 邹声泉, 裘法祖, 华中科技大学同济医学院附属同济医院普外科 湖北省武汉市 430030
吴高松, 男, 1966-05-03生, 湖北省武穴市人, 汉族. 1989年同济医科大学本科毕业, 2000年同济医科大学博士研究生毕业, 主治医师. 主要从事肝胆外科分子生物学研究.
通讯作者: 吴高松, 430030, 湖北省武汉市, 华中科技大学同济医学院附属同济医院普外科. wugaosong9172@sina.com
电话: 027-83660874 传真: 027-83662851
收稿日期: 2002-11-06
修回日期: 2002-11-10
接受日期: 2002-11-13
在线出版日期: 2003-06-15
修回日期: 2002-11-10
接受日期: 2002-11-13
在线出版日期: 2003-06-15
Abstract
目的
用反义环氧合酶-2(COX-2)重组载体转染COX-2高表达人胆管癌细胞QBC939, 观察其对QBC939细胞的生长抑制作用, 并探讨其作用机制.
方法
通过脂质体介导将COX-2反义核酸质粒转入QBC939细胞, 经G418筛选获得稳定表达COX-2反义核酸的胆管癌转染细胞模型. 采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测转染前后QBC939细胞COX-2 mRNA表达的变化, 应用免疫细胞化学链霉亲合素-生物素复合物(SABC)技术检测转染前后QBC939细胞COX-2蛋白表达水平的变化, 应用四唑氮蓝(MTT)比色法检测COX-2反义核酸对QBC939细胞增生的影响, 应用流式细胞仪测定细胞周期和细胞凋亡.
结果
反义COX-2基因转染后胆管癌细胞中COX-2 mRNA表达水平明显下调, COX-2蛋白表达减弱. 转染反义COX-2重组载体的QBC939细胞生长速率明显下降(P<0.01), 细胞周期分析转染后细胞比转染前细胞增生指数显著下降(P<0.01), S期细胞比例为9.27±1.91%, 比转染前(16.35±2.87%)明显降低(P<0.05), G0/G1期细胞比例为75.16±4.13%, 比转染前(57.31±10.16%) 明显上升(P<0.05), 细胞被抑制在G0/G1期; COX-2反义核酸转染对QBC939细胞凋亡率无明显影响(P>0.05).
结论
COX-2反义核酸导入可抑制QBC939细胞增生.
Keywords: N/A