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转导单链免疫毒素基因的PBMCs对人肝癌细胞SMMC-7721的体外杀伤活性
程虹, 刘彦仿, 张静, 中国人民解放军第四军医大学基础部病理学教研室 陕西省西安市 710033
张惠中, 沈万安, 中国人民解放军第四军医大学唐都医院全军骨肿瘤研究所 陕西省西安市 710038
张菊, 中国人民解放军第四军医大学基础部生物化学教研室 陕西省西安市 710033
程虹, 女, 1967-06-24生, 安徽省宣州市人, 汉族, 病理学博士, 讲师.
基金项目: 军队"九·五"重点补充课题 , No. 98M098 .
通讯作者: 刘彦仿, 710033, 陕西省西安市, 中国人民解放军第四军医大学基础部病理学教研室. yfliu@fmmu.edu.cn
电话: 029-3375497
收稿日期: 2002-11-19
修回日期: 2002-12-02
接受日期: 2002-12-20
在线出版日期: 2003-03-15
修回日期: 2002-12-02
接受日期: 2002-12-20
在线出版日期: 2003-03-15
Abstract
目的: 用携带分泌型抗肝癌单链免疫毒素基因(sFv-TNF-α)的重组逆转录病毒感染人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMCs), 使其表达并分泌针对人肝癌细胞的sFv-TNF-α融合蛋白, 观察转导的PBMCs对体外培养人肝癌细胞SMMC-7721的杀伤作用.
方法: 用感染性重组病毒产生细胞C22(PA317/PST)产生的病毒上清转导人PBMCs, 采用PCR和RT-PCR方法对转导的PBMCs(PBMCs/PST)进行DNA和mRNA水平的分析. PBMCs/PST与SMMC-7721共培养, MTT法检测PBMCs/PST表达产物对肝癌细胞的体外杀伤活性.
结果: PCR及RT-PCR结果显示PBMCs/PST中扩增出外源目的基因对应的电泳条带. MTT法检测结果, 分泌型抗肝癌单链免疫毒素对体外培养肝癌细胞SMMC-7721的杀伤率为(38.2±6.7)%.
结论: 分泌型抗肝癌单链免疫毒素基因可以在PBMCs中整合并稳定表达, 其分泌的表达产物对SMMC-7721具有一定的体外杀伤作用.
Keywords: N/A