修回日期: 2002-08-01
接受日期: 2002-08-16
在线出版日期: 2003-03-15
目的: 探讨莪术油微球(CAO-MS)释放出莪术油(CAO)对人肝癌SMMC-7721细胞的生长抑制作用及机制.
方法: 用MTT法测定CAO及CAO-MS对体外培养的人肝癌细胞系SMMC-7721的生长抑制作用. 用FCM测定CAO及CAO-MS对人肝癌细胞周期的影响. 用DNA含量测定、AnnexinⅤ标记、电镜观察细胞形态检测CAO及CAO-MS对人肝癌细胞的诱导凋亡作用. 用免疫细胞化学(ICC)及RT-PCR方法分别检测p21WAF1/CIP1蛋白与mRNA表达水平.
结果: CAO与CAO-MS对肝癌细胞的生长抑制作用与药物浓度及作用时间呈一定的依赖关系(P<0.01). 药物作用72 h时, CAO与CAO-MS对SMMC-7721的半数抑制浓度(IC50)分别约为50 mg/L和100 mg/L. 50 mg/L CAO和100 mg/L CAO-MS作用于肝癌细胞72 h后, 使G0+G1比例增加, S期及G2+M期比例相对下降, 细胞周期阻滞于G0+G1期. DNA含量测定、AnnexinⅤ标记、形态学研究结果提示, CAO与CAO-MS均能诱导肝癌细胞的凋亡, CAO的作用优于CAO-MS. ICC 和RT-PCR检测结果表明, 50 mg/L CAO 和100 mg/L CAO-MS作用于肝癌细胞72 h后, 均能提高 CAO-MS p21WAF1/CIP1蛋白及mRNA表达水平, 相同剂量的CAO的作用优于CAO-MS.
结论: CAO及CAO-MS对人肝癌细胞SMMC-7721均有显著的抑制增生作用, 作用呈剂量依赖性; CAO及CAO-MS能诱导对人肝癌细胞SMMC-7721凋亡, 并能使细胞周期阻滞于G0+G1期; CAO及CAO-MS抑制肝癌细胞增生及诱导其凋亡的机制可能与其上调p21WAF1/CIP1基因表达有关.