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世界华人消化杂志. 2003-11-15; 11(11): 1706-1710
Published online 2003-11-15. doi: 10.11569/wcjd.v11.i11.1706
Published online 2003-11-15. doi: 10.11569/wcjd.v11.i11.1706
吲哚美辛对野生型p53转染的结肠癌细胞株SW480的影响
张桂英, 徐美华, 谢兆霞, 中南大学湘雅医院消化内科 湖南省长沙市 410078
徐美华, 女, 1967-06-05生, 湖南省桃江县人, 汉族, 1991年湖南医科大学本科毕业, 2002年中南大学湘雅医学院博士研究生毕业, 主要从事消化道肿瘤研究.
何春梅, 中南大学湘雅医学院 湖南省长沙市 410078
基金项目: 卫生部自然科学基金资助项目 , No. 98-2-088 .
通讯作者: 张桂英, 410078, 湖南省长沙市湘雅路141号, 中南大学湘雅医院消化内科. meihuaxu2001@yahoo.com.cn
电话: 0731-4327249
收稿日期: 2002-10-18
修回日期: 2003-03-20
接受日期: 2003-05-21
在线出版日期: 2003-11-15
修回日期: 2003-03-20
接受日期: 2003-05-21
在线出版日期: 2003-11-15
Abstract
目的
探讨吲哚美辛抗结肠癌作用是否呈p53依赖性及其部分分子机制.
方法
采用含突变型p53的SW480细胞株为研究对象, 利用基因转染技术, 将野生型p53转染SW480细胞. 不同浓度的吲哚美辛进行干预, 采用吖啶橙、溴化乙锭荧光染色, 荧光显微镜及透射电镜下观察wtp53/SW480细胞凋亡; Western 斑点免疫印迹检测wtp53/SW480细胞中Bcl-2、 Bax及p21WAF1/CIPI蛋白表达.
结果
吲哚美辛诱导野生型p53转染的wtp53 /SW480细胞凋亡, 出现形态学改变: 即细胞核固缩、裂解, 核碎片及凋亡小体形成. 凋亡细胞计数显示该作用呈浓度－时间依赖性, 其中600 μmol/LIN作用于wtp53/SW480细胞72 h, 其凋亡细胞百分率为60.1±2.5%; 而对照组其凋亡细胞百分率为5.0±2.0%, P<0.01, 二者比较有显著性差异. 吲哚美辛作用于wtp53/SW480细胞24 h, 其Bcl-2蛋白表达水平下调, 呈浓度依赖性, 而Bax蛋白表达无改变; 未转染的SW480细胞中Bcl-2, Bax蛋白均无影响. 吲哚美辛作用于wtp53/SW480细胞24 h, 其p21WAF1/CIPI蛋白表达水平随着一定范围内吲哚美辛浓度的增加而逐渐上调, 以400 μmol/L吲哚美辛作用最强, 600 μmol/L吲哚美辛作用后回到基础水平. 而在未转的SW480细胞中p21WAF1/CIPI蛋白的表达无明显改变.
结论
IN通过下调Bcl-2蛋白, 上调p21WAF1/CIPI蛋白的表达来诱导wtp53/SW480细胞凋亡.
Keywords: N/A