基础研究
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世界华人消化杂志. 2003-11-15; 11(11): 1694-1698
Published online 2003-11-15. doi: 10.11569/wcjd.v11.i11.1694
冷保存再灌注期间离体肝组织内氧自由基及[Ca2+]i对p38MAPK激活的影响
王雨, 田伏洲, 汤礼军, 张晓琼
王雨, 田伏洲, 汤礼军, 张晓琼, 中国人民解放军成都军区总医院全军普通外科中心 四川省成都市 610083
王雨, 男, 1969-11-20生, 四川省宣汉县人, 汉族. 1993年华西医科大学本科毕业, 2001年第三军医大学博士研究生毕业, 主治医师. 主要从事肝胆及胰腺外科的研究.
通讯作者: 王雨, 610083, 四川省成都市天回镇, 中国人民解放军成都军区总医院全军普通外科中心. wangyu666@Hotmail.com
电话: 028-86570353
收稿日期: 2002-03-05
修回日期: 2002-07-20
接受日期: 2002-08-23
在线出版日期: 2003-11-15
Abstract
目的

了解离体肝脏缺血再灌注期间氧自由基及钙离子超载是否是激活p38MAPK的因素之一, 为进一步揭示肝脏缺血再灌注损伤的信号转导机制打下基础.

方法

通过自行建立的兔离体肝脏缺血再灌注模型, 根据冷保存液中别嘌呤醇浓度的不同分为A、B、C、D 4组; 根据冷保存液中维拉帕米浓度的不同又分为E、F、G、H 4组; 分别于离体前、冷保存末及再灌注5 min、10 min、60 min、120 min获取离体肝组织, 分别应用免疫映迹杂交(western-blot)和免疫沉淀法测定磷酸化p38MAPK的表达及活性水平; 并进行肝组织内氧自由基(oxygen free radicals, OFR)含量的测定(A、B、C、D组); 用Fura-2/AM负载法进行肝细胞内钙离子浓度测定(A、E、F、G组).

结果

于再灌注5 min各组离体肝组织的氧自由基水平升高至峰值, 但各组两两之间存在显著性差异(A、B、C、D组: 2.32±0.22, 1.82±0.15, 1.63±0.11, 1.29±0.10 , P<0.05, t =2.57); 于再灌注10 min供肝组织p38MAPK磷酸化水平及活性均升高至峰值, 但各组两两之间存在显著性差异(A、B、C、D组p38MAPK磷酸化水平: 76.2±7.0, 61.4±5.9, 47.3±2.5, 37.7±3.0, P<0.05, t = 2.61; A、B、C、D组p38MAPK活性水平: 82.7±6.8, 69.7±5.2, 54.5±5.5, 41.2±3.1, P<0.05, t = 2.61; A、E、F、G组p38MAPK磷酸化水平: 80.3±8.7, 63.3±4.2, 50.4±5.6, 39.2±5.7, P<0.05, t = 2.61; A、E、F、G组p38MAPK活性水平: 80.8±8.9, 66.7±4.2, 53.7±4.1, 39.4±5.5, P<0.05, t = 2.61); 再灌注5 min时氧自由基及[Ca2＋]i越高的离体肝, 则再灌注10 min时离体肝组织p38活性峰值越高, 二者之间呈显著性相关关系. (P<0.05, ROFR = 0.976, RCa = 0.970)

结论

别嘌呤醇能显著性抑制离体肝缺血再灌注期间肝组织内OFR水平, 而维拉帕米能显著性抑制离体肝缺血再灌注期间肝细胞内钙离子浓度超载; 而且OFR水平及钙离子与离体肝组织p38MAPK的激活密切相关.

Keywords: N/A