表达HBVX基因的小鼠模型的建立及对肝细胞凋亡因子的影响

表1 各基因引物及反应条件

基因	片段长度(bp)	引物	反应条件
HBVX	465	上游: 5'-ATGCAAGCTTATGGCTGCTAGGCTGTACTG-3'	95 ℃预变性5 min, 95 ℃变性45 s, 60 ℃退火30 s, 72 ℃延伸1 min
		下游: 5'-TGCGAATTCTTAGGCAGAGGTGAAAAAGTT-3'
β-actin	600	上游: 5'-GGCATCGTGATGGACTCCG-3'	95 ℃预变性5 min, 95 ℃变性45 s, 60 ℃退火30 s, 72 ℃延伸1 min
		下游: 5'-GCTGGAAGGTGGACAGCGA-3'
bax	246	上游: 5'-TTTGCTTCAGGGTTTCATCC-3'	94 ℃预变性5 min, 94 ℃变性45 s, 58 ℃退火30 s, 72 ℃延伸1 min, 30个循环
		下游: 5'-CAGTTGAAGTTGCCGTCAGA-3'
bcl-2	198	上游 5'-GGCTGGGATACTTTTGTGGA-3'	94 ℃预变性5 min, 94 ℃变性45 s, 64 ℃退火30 s, 72 ℃延伸40 s, 25个循环
		下游: 5'-ATGTGGTGGAGCAGAGAAGG-3'
c-myc	203	上游: 5'-TTCGGGTAGTGGAAAACCAG-3'	94 ℃预变性5 min, 94 ℃变性45 s, 58 ℃退火30 s, 72 ℃延伸1 min, 30个循环
		下游: 5'-CAGCAGCTCGAATTTCTTCC-3'

表2 各基因RT-PCR条带与β-actin内参灰度比值

分组	bax	bcl-2	c-myc
实验组	1.3127±0.0900	1.5567±0.1257	1.6294±0.0672
空质粒对照组	1.0023±0.1670	0.6856±0.1554	1.2869±0.0880
生理盐水对照组	0.9094±0.1081	0.5488±0.1278	0.9757±0.0397