幽门螺杆菌OipA、HopX、HopW基因的检测及序列分析

表1 基因及引物序列

基因	引物序列
OipA	5'-CCGGATCCATGAAAAAAGCTCTCTTACT-3'
	5'-CGCGGCTCGAGTTAATGTTTGTTTTTAAAGTT-3'
HopX	5'-AAAAGGATCCGAAGACGATGGCTTTTATATGGGA-3'
	5'-AAAACTCGAGTTAAAAACCTATCGTGTAGTTGAT-3'
HopW	5'-AAAAAAGGTACCCATGAAAAGAATGGCGCGTTTGTG-3'
	5'-AAAAAAAAGCTTTTATCAAAAAGTATAAACATAGCGCAA-3'

表2 反应体系及条件

Gene	反应体系	反应条件
OipA	50 μL反应体系(10×buffer 5 μL、dNTP 4 μL、DNA模板2 μL、浓度为10 μmol/L的引物各1 μL、2 min、72℃ 55 s, 72℃ 7 min Taq聚合酶0.25 μL、ddH2O 36 μL	94℃ 4 min, 94℃ 2 min、51.7℃ 2 min、72℃ 55 s, 72℃ 7 min(2-4, 40个循环)
HopX	50 μL反应体系(10×buffer 5 μL、dNTP 4 μL、DNA模板2 μL、浓度为10 μmol/L的引物各1.2 μL、Taq聚合酶0.4 μL、ddH2O 36 μL	3 min, 94℃ 30 s、56℃ 30 s、72℃ 1 min, 72℃ 7 min(2-4, 30个循环)
HopW	50 μL反应体系(10×buffer 5 μL、dNTP 4 μL、DNA模板2 μL、浓度为10 μmol/L的引物各1.2 μL、Taq聚合酶0.4 μL、ddH2O 36 μL	3 min, 94℃ 30 s、56℃ 30 s、72℃ 1 min, 72℃ 7 min(2-4, 30个循环)