临床经验 Open Access
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世界华人消化杂志. 2010-11-08; 18(31): 3359-3365
在线出版日期: 2010-11-08. doi: 10.11569/wcjd.v18.i31.3359
HPV16E6、TAP2与新疆哈萨克族食管癌交互作用的1∶2病例对照
蔡金凤, 马彦清, 徐莉, 曾同霞, 李锋, 廖佩花, 秦江梅
蔡金凤, 曾同霞, 李锋, 秦江梅, 新疆地方病与民族高发病省部共建重点实验室 石河子大学医学院预防医学系 新疆维吾尔自治区石河子市 832002
马彦清, 徐莉, 伊犁哈萨克自治州友谊医院胸心外科 新疆维吾尔自治区伊犁哈萨克自治州伊宁市 835000
廖佩花, 新疆生产建设兵团医院科教科 新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 830002
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 30660161; 国家重点基础研究发展规划基金资助项目(973计划), No. 2005CCA03700; 2006年教育部科学技术研究重点基金资助项目, No. 206167; 国家973计划前期研究专项基金资助项目, No. 2007CB516804
作者贡献分布: 此课题由秦江梅与李锋设计并组织实施; 蔡金凤、马彦清及徐莉负责问卷调查与标本的收集工作; 蔡金凤、曾同霞及廖佩花参与HPV16E6、Tap2基因多态实验与数据分析; 本论文写作由蔡金凤与秦江梅完成.
通讯作者: 秦江梅, 教授, 832002, 新疆维吾尔自治区石河子市, 新疆地方病与民族高发病省部共建重点实验室, 石河子大学医学院预防医学系. qinjiangmei@yahoo.com.cn
收稿日期: 2010-08-12
修回日期: 2010-09-21
接受日期: 2010-09-27
在线出版日期: 2010-11-08

目的: 探讨HPV16E6感染、Tap2379、Tap2665、Tap2687基因多态性对新疆哈萨克族(简称哈族)食管癌产生的影响及相互关系.

方法: 采用1∶2配比的病例对照研究, 收集哈族食管癌90例, 对照180例, 运用序列特异性聚合酶链反应(PCR-SSP)检测HPV16E6的感染率, 运用序列特异性引物聚合酶链反应-限制片段长度多态技术(PCR-RFLP)检测Tap2379、Tap2665、Tap2687基因多态性, 统计分析采用χ2检验, 交互作用采用分层分析.

结果: 食管癌组与对照组间比较: HPV16E6、Tap2379、Tap2665基因型差异均有统计学意义(χ2 = 11.617, P = 0.001; χ2 = 11.604, P = 0.001; χ2 = 4.451, P = 0.035), Tap2687基因型差异无统计学意义(χ2 = 0.586, P = 0.444). HPV16E6感染与Tap2379、Tap2665基因多态性间不存在交互作用; Tap2379与Tap2665基因多态性存在交互作用.

结论: HPV16E6感染, Tap2379、Tap2665多态性是哈族食管癌的危险因素, Tap2379位多态性与Tap2665位多态性对哈族食管癌的发生存在效应修饰作用.

关键词: 哈萨克族; 食管癌; 人乳头瘤病毒16E6; 抗原加工相关转运体; 遗传多态性
引文著录: 蔡金凤, 马彦清, 徐莉, 曾同霞, 李锋, 廖佩花, 秦江梅. HPV16E6、TAP2与新疆哈萨克族食管癌交互作用的1∶2病例对照. 世界华人消化杂志 2010; 18(31): 3359-3365
Association of HPV16 E6 infection and TAP2 gene polymorphisms with esophageal cancer risk in a Kazakh population: a 1∶2 matched case-control study
Jin-Feng Cai, Yan-Qing Ma, Li Xu, Tong-Xia Zeng, Feng Li, Pei-Hua Liao, Jiang-Mei Qin
Jin-Feng Cai, Tong-Xia Zeng, Feng Li, Jiang-Mei Qin, Key Laboratory of Xinjiang Endemic and Ethnic Diseases, Department of Preventive Medicine, Shihezi University, Shihezi 832002, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China
Yan-Qing Ma, Li Xu, Department of Gastroenterology, Youyi Hospital of Yili Canton, Yining 835000, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China
Pei-Hua Liao, Department of Scientific Education, Hospital of Xinjiang Production and Construction Corps, Urumqi 830002, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China
Supported by: National Natural Science Foundation of China, No. 30660161; the Major State Basic Research Development Program of China (973 Program), No. 2005CCA03700; the Key Program of Ministry of Education of China, No. 206167; and the Special Foundation for 973 Program of China, No. 2007CB516804
Correspondence to: Professor Jiang-Mei Qin, Key Laboratory of Xinjiang Endemic and Ethnic Diseases, Department of Preventive Medicine, Shihezi University, Shihezi 832002, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China. qinjiangmei@yahoo.com.cn
Received: August 12, 2010
Revised: September 21, 2010
Accepted: September 27, 2010
Published online: November 8, 2010

AIM: To evaluate the association of human papillomavirus 16 E6 (HPV16 E6) infection and transporter associated with antigen processing 2 (TAP2) 2379/2665/2687 genetic polymorphisms with the risk of esophageal cancer (EC) in a high incidence area for EC in Xinjiang, China.

METHODS: A case-control study was conducted. Ninety EC patients and 180 controls were included in the study. Each patient was matched to two controls. HPV16 E6 infection was identified by PCR-SSP, and TAP2 2379/2665/2687 genotypes were detected by PCR-RFLP.

RESULTS: The rate of HPV16 E6 infection and the genotype frequencies of TAP2 2379/2665 polymorphisms differed significantly between EC patients and controls (χ2 = 11.617, 11.604, 4.451; P = 0.001, 0.001, 0.035). The genotype frequency of TAP2 2687 polymorphism showed no significant difference between the two groups of subjects (χ2 = 0.586, P = 0.444). No interaction was found among HPV16 E6 infection and TAP2 2379/2665 genetic polymorphisms, while interaction between TAP2 2379/2665 genetic polymorphisms was noted.

CONCLUSION: HPV16 E6 infection and TAP2 2379/T2665 genetic polymorphisms are important risk factors for EC in the Kazakh population.

Key Words: Kazakh; Esophageal cancer; Human papillomavirus 16 E6; Transporter associated with antigen processing 2; Genetic polymorphism
0 引言

人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)在感染细胞中以两种形式存在, 一种是病毒DNA与宿主细胞染色体相整合, 另一种是病毒DNA游离于宿主细胞染色体外. HPV感染宿主细胞后的致癌作用与HPV DNA整合入宿主细胞有关[1]. 研究显示: HPV的E6、E7原癌蛋白可引起食管细胞永生化, 这可能是食管癌发生的危险因素之一[2,3]. 凡致癌的生物因素(如病毒)均不会引起急性传染性疾病的发生, 而是一个长期的慢性过程, 同时需要机体的遗传易感因素的存在. 细胞的癌变是一个多因素、多阶段、多基因的复杂过程, HPV感染后要经过很长时间才能导致食管癌, 而多种基因的多态性可能在HPV相关的食管癌中发挥着遗传易感作用或保护作用. 抗原加工相关转运体(transporter of antigen processing, Tap)是抗原呈递机制中重要的一员, 在人类组织相容性复合体(major histocompatibility complex, MHC)-Ⅰ类分子的成熟及膜表面表达中起着十分重要的作用, Tap基因的缺失或突变可能是导致Tap表达下降或功能障碍的一个主要原因, 当Tap功能障碍或表达下降都将导致肿瘤抗原不能被有效地转运, 可能导致肿瘤逃逸免疫监视[4]. Cao等[5]研究显示: 人类白细胞抗原(human leukocyte antigen, HLA)-Ⅱ类基因区的LMP7/Tap2基因多态性与安阳地区HPV相关食管癌有关, 并推测宿主的某些免疫相关基因将影响宿主对HPV病毒的清除, 而导致细胞恶性转化. 因此, 食管癌与HPV感染及其与免疫相关基因之间的相互关系是一个值得研究的问题. 本研究利用1∶2病例对照研究, 采用分子生物学方法, 对哈萨克族(简称哈族)食管癌病例和对照组人群进行HPV感染的检测, 并从分子水平探讨与HPV感染有关的免疫相关基因Tap2的基因型和等位基因频率, 比较其在食管癌病例和对照中的分布, 分析HPV感染及与免疫相关基因遗传多态性的关系及相互间的交互作用, 探讨哈族食管癌高发的原因.

1 材料和方法
1.1 材料

2006-11/2010-03新疆北部哈族聚集地区的6所医院共收集哈族新发食管癌病例90例, 其中男58例, 女32例; 对照180例, 其中男116例, 女64例. 对照组部分来源于同一所医院门诊胃镜非食管疾病患者, 部分来源于食管癌高发区正常人群, 所有标本均经组织病理学确诊或排除. 对照的匹配条件: 同民族、同性别、年龄相差不超过5岁、居住同一地区. 患者和对照组均已签署知情同意书. 主要仪器与试剂: PCR仪(德国Biometra公司); 离心机(德国Thermo公司); 紫外分光光度仪(北京普析通用仪器公司); 琼脂糖(上海杰瑞公司); PCR扩增试剂: 三磷酸碱基脱氧核苷酸(dNTP), Taq酶, 10×PCR Buffer及内切酶MspⅠ(大连宝生物公司), BstuⅠ(Fermentas), BfaⅠ(大连宝生物公司).

1.2 方法

1.2.1 DNA抽提、PCR扩增及酶切: 食管癌病例及对照均取新鲜全血; 食管癌病例取石蜡包埋组织, 对照取正常食管新鲜黏膜组织, -80 ℃低温保存备用. 基因组DNA提取采用酚-氯仿-异戊醇法; 所有抽提的DNA均经1%琼脂糖凝胶电泳验证. PCR扩增所使用的引物参照文献[6-8](表1).

表1 PCR扩增所使用的引物序列.
引物名称 引物序列扩增长度(bp)
HPV16E6For: 5'-GACCCAGAAAGTTACCACAG-3'
Rev: 5'-CACAACGGTTTGTTGTATTG-3'268
Tap2379For: 5'-GCCCGTGCCTTGTACCTGCGC-3'
Rev: 5'-ACCCCCAAGTGGAGCAC-3'213
Tap2665For: 5'-GGTGATTGCTCACAGGCTGCCG-3'
Rev: 5'-CACAGCTCTAGGGAAACTC-3'227
Tap2687For: 5'-ACAGTGCTGGTGATTGCTC-3'
Rev: 5'-CACAGCTCTAGGGAAACTC-3'233

HPV16E6 PCR反应总体积25 μL, 基因组DNA 2 μL, 引物(20 μmol/L)各0.8 μL, dNTP 2.0 μL, Taq酶(5 U/μL)0.2 μL, 10×PCR Buffer(含Mg2+)2.5 μL. PCR扩增条件为: 94 ℃预变性5 min, 94 ℃ 45 s、58 ℃ 45 s、72 ℃ 45 s, 共35个循环, 最后72 ℃延伸10 min. Tap2379和Tap2665反应总体积25 μL, 基因组DNA 2 μL, 引物(25 μmol/L)各0.8 μL, dNTP 2.0 μL, Taq酶(2.5 U/μL)0.4 μL, 10×PCR Buffer(含Mg2+)2.5 μL. PCR扩增条件为: 94 ℃预变性5 min, 94 ℃ 45 s、56 ℃ 45 s、72 ℃ 45 s, 共35个循环, 最后72 ℃延伸10 min. Tap2687反应总体积25 μL, 基因组DNA 2 μL, 引物(25 μmol/L)各0.4 μL, dNTP 2.0 μL, Taq酶(2.5 U/μL)0.4 μL, 10×PCR Buffer(含Mg2+)2.5 μL. PCR扩增条件为: 94℃预变性5 min, 94 ℃ 40 s、53 ℃ 45 s、72 ℃ 50 s, 共35个循环, 最后72 ℃延伸5 min. Tap2379 PCR产物用BstuⅠ内切酶酶切, Tap2665 PCR产物用MspⅠ内切酶酶切, Tap2687 PCR产物用BfaⅠ内切酶酶切, 37 ℃水浴12 h.

1.2.2 PCR产物及酶切产物鉴定: 2%和3%琼脂糖凝胶电泳分别用于鉴定HPV16E6阳性率和Tap2379、Tap2665、Tap2687基因型, 用DNA MarkerⅠ(100-600 bp)作为参照. HPV16E6阳性者出现268 bp的目的片断, 阴性者不出现; Tap2379基因型分3种: Val(G)/Val(G)、Val(G)/Ile(A)、Ile(A)/Ile(A), 片段长度分别为193 bp+20 bp、213 bp+193 bp+20 bp、213 bp; Tap2665基因型分3种: Thr(A)/Thr(A)、Thr(A)/Ala(G)、Ala(G)/Ala(G), 片段长度分别为227 bp、227 bp+207 bp+20 bp、207 bp+20 bp; Tap2687基因型分3种: Gln(Q)/Gln(Q)、Gln(Q)/Stop(S)、Stop(S)/Stop(S), 片段长度分别为223 bp+10 bp、223 bp+127 bp+96 bp+10 bp、127 bp+96 bp+10 bp.

统计学处理 使用Epidata建立数据库, 采用SPSS13.0统计软件进行分析, 以1∶2配对资料χ2检验、P值、OR值及95%CI确定HPV16E6阳性率及Tap2379、Tap2665、Tap2687基因多态性在食管癌组和对照组中的分布差异, 1∶2配对资料χ2检验涉及到的公式[3]有: n2的期望值: E(n2) = (n2+n4)/3, n2的方差: Var(n2) = 2(n2+n4)/9, n1的期望值: E(n1) = 2(n1+n3)/3, n1的方差: Var(n1) = 2(n1+n3)/9, χ2 = [n2-E(n2)+n1-E(n1)]2/[Var(n2)+Var(n1)], OR = (n1+2n2)/(2n5+n4).

2 结果
2.1 一般情况

食管癌组与对照组性别差异无统计学意义(χ2 = 0.000, P = 1.000); 年龄差异无统计学意义(t = 1. 355, P = 0.177). Hardy Weinberg遗传平衡检验人群Tap2379、Tap2665、Tap2687基因型频率, 差异均无统计学意义(χ2 = 0.976, P>0.05; χ2 = 0.770, P>0.05; χ2 = 1.116, P>0.05), 说明这三者基因型频率已达到遗传平衡, 具有人群代表性. 对所有HPV16E6及Tap2379、Tap2665基因型频率的PCR扩增产物用2.0%的琼脂糖凝胶电泳鉴定, 扩增产物的目的片断分别为268 bp、213 bp和227 bp(图1-3). 对Tap2 PCR扩增产物进行特异性内切酶酶切, 3%琼脂糖凝胶电泳用于鉴定Tap2基因型, 用DNA MarkerⅠ(100-600 bp)作为参照. Tap2379 PCR产物用BstuⅠ内切酶酶切, 其基因型分3种: Val(G)/Val(G)、Val(G)/Ile(A)、Ile(A)/Ile(A), 片段长度分别为193 bp+20 bp、213 bp+193 bp+20 bp、213 bp; Tap2665 PCR产物用MspⅠ内切酶酶切, 其基因型分3种: Thr(A)/Thr(A)、Thr(A)/Ala(G)、Ala(G)/Ala(G), 片段长度分别为227 bp、227 bp +207 bp+20 bp、207 bp+20 bp(图4, 5).

图1
图1 HPV16E6 PCR扩增电泳图. M: DNA Marker; 1: 阳性对照, 2: 阴性对照, 3、6、7、9、10: 阳性, 4、5、8、11: 阴性.
图2
图2 Tap2379PCR电泳图. M: DNA Marker; 1: 阴性对照; 2-11: 阳性.
图3
图3 Tap2665 PCR扩增电泳图. M: DNA Marker; 1-4, 6-11: 阳性; 5: 阴性对照.
图4
图4 Tap2379酶切图. M: DNA Marker; 1、2、4: A/A型; 3、5: G/G型; 6: G/A型.
图5
图5 Tap2665酶切图. M: DNA Marker; 1-3、5、7-9、12: A/A型; 4、6、10、11: A/G型; 13: G/G型.
2.2 HPV16E6、Tap2基因多态性与哈族食管癌的关系

单因素条件Logistic回归显示: 食管癌组和对照组, HPV16E6, Tap2379、Tap2665基因型差异均有统计学意义(χ2 = 11.617, P = 0.001; χ2 = 11.604, P = 0.001; χ2 = 4.451, P = 0.035), Tap2687基因型差异无统计学意义(χ2 = 0.586, P = 0.444, 表2).

表2 HPV16E6、Tap2基因多态性与哈族食管癌的关系.
病例n(%)对照n(%)P值OR(95%CI)
HPV16E6
-63(70.00)158(87.78)1. 000
+27(30.00)22(12.22)0.0013.159(1.630-6.122)
Tap2379
G/G57(63.33)150(83.33)1.000
G/A27(30.00)26(14.44)0.0032.525(1.366-4.670)
A/A6(6.67)4(2.22)0.0633.822(0.932-15.684)
G/G57(63. 33)150(83.33)1.000
G/A+A/A33(36. 67)30(16.67)0.0012.694(1.523-4.764)
Tap2665
A/A43(47.78)111(61.67)1.000
A/G38(42.22)57(31.67)0.0561.686(0.986-2.883)
G/G9(10.00)12(6.67)0.1801.907(0.742-4.903)
A/A43(47.78)111(61.67)1.000
A/G+G/G47(52.22)69(38.33)0.0351.724(1.039-2.860)
Tap2687
T/T32(35.56)73(40.56)1.000
T/C30(33.33)62(34.44)0.7701.090(0.612-1.941)
C/C28(31.11)45(25.00)0.2731.421(0.758-2.664)
T/T32(35.56)73(40.56)1.000
T/C+C/C58(64.44)107(59.44)0.4441.218(0.735-2.016)
2.3 HPV16E6与Tap2基因多态性的交互作用

2.3.1 HPV16E6阳性和Tap2379基因多态性的交互作用: 以两因素均为阴性为对照, HPV16E6阴性、Tap2379阳性的个体发生食管癌的风险为3.500(95%CI: 1.807-6.780); HPV16E6阳性、Tap2379阴性的个体发生食管癌的风险为3.912(95%CI: 1.853-8.257); HPV16E6、Tap2379两者均为阳性的个体发生食管癌的风险为5.600(95%CI: 1.731-18.117), 其仅稍大于两者单独作用之和, 提示HPV16E6阳性与Tap2379基因多态性无交互作用(表3).

表3 HPV16E6与Tap2379、Tap2665基因多态性的交互作用.
HPV16E6病例(n)对照(n)χ2值P值OR(95%CI)
Tap2379--381331.000
Tap2379-+191713.9150.0003.912(1.853-8.257)
Tap2379+-252514.6470.0003.500(1.807-6.780)
Tap2379++857.9740.0055.600(1.731-18.117)
Tap2665--26971.000
Tap2665-+171413.9720.0004.530(1.977-10.382)
Tap2665+-37617.3900.0072.263(1.248-4.103)
Tap2665++1088.0560.0054.663(1.672-13.004)
以Tap2379突变杂合型(G/A)和突变纯合型(A/A)为暴露, 用"+"表示; Tap2379野生纯合型(G/G)为非暴露, 以"-"表示; 以Tap2665突变杂合型(A/G)和突变纯合型(G/G)为暴露, 用"+"表示; Tap2665野生纯合型(A/A)为非暴露, 以"-"表示.

2.3.2 HPV16E6阳性和Tap2665基因多态性的交互作用: 以两因素均为阴性为对照, HPV16E6阴性、Tap2665阳性的个体发生食管癌的风险为2.263(95%CI: 1.248-4.103); HPV16E6阳性、Tap2665阴性的个体发生食管癌的风险为4.530(95%CI: 1.977-10.382); HPV16E6、Tap2665两者均为阳性的个体发生食管癌的风险为4.663(95%CI: 1.672-13.004), 其危险性稍高于两者单独作用之和, 提示HPV16E6阳性与Tap2665基因多态性不存在交互作用(表3).

2.3.3 Tap2379、Tap2665基因多态性的交互作用: 以两因素均为阴性为对照, Tap2379阴性、Tap2665阳性的个体发生食管癌的风险为1.621(95%CI: 0.878-2.994); Tap2379阳性、Tap2665阴性的个体发生食管癌的风险为2.397(95%CI: 1.105-5.202); Tap2379与Tap2665基因多态性两者均为阳性的个体发生食管癌的风险为7.005(95%CI: 2.725-18.008), 其远大于两者单独作用之和, 提示Tap2379与Tap2665基因多态性存在交互作用(表4).

表4 Tap2379与Tap2665基因多态性的交互作用.
Tap2665Tap2379病例(n)对照(n)χ2值P值OR(95%CI)
--27891. 000
-+30612.4000.1212.397(1.105-5.202)
+-16225.0420.0251.621(0.878-2.994)
++17819.1640.0007.005(2.725-18.008)
以Tap2379突变杂合型(G/A)和突变纯合型(A/A)为暴露, 用"+"表示; Tap2379野生纯合型(G/G)为非暴露, 以"-"表示; 以Tap2665突变杂合型(A/G)和突变纯合型(G/G)为暴露, 用"+"表示; Tap2665野生纯合型(A/A)为非暴露, 以"-"表示.
3 讨论

分子生物学和流行病学已证实HPV16在宫颈癌的发生中具有重要作用, 但与食管癌的关系不明确. 高危型HPVE6和E7基因主要涉及细胞转化, 当HPV的DNA整合到宿主细胞核内基因组中, 激活调节病毒生长的E6和E7基因片段, 使其无限转录, 从而导致癌变的发生[9]. 许春雷等[3]采用免疫组织化学法对食管癌的研究表明, HPV16E6、E7蛋白在食管癌组织中的表达要高于正常食管黏膜组织(P<0.05), 推测二者可能是食管癌发生、发展的重要因素之一. 邹赛英等[10]采用PCR及免疫组织化学技术对104例食管鳞癌进行HPVE6蛋白的检测, 发现HPV16E6在食管鳞癌的发生发展中有重要的作用. 刘文康等[11]采用PCR技术检测40例食管鳞癌和20例正常食管黏膜中HPV16E6、E7基因, 发现与二者与食管鳞癌的发生和发展有关. 本研究通过PCR-SSP技术检测食管癌组及对照组中HPV16E6的感染率, 结果发现90例食管癌中HPV16E6感染者有27例, 高于对照组(30.00% vs 12.22%, P = 0.000), HPV16E6感染的个体发生食管癌的风险是HPV16E6阴性个体的3.159倍(95%CI: 1.630-6.122), 与上述研究结果一致, 也与本课题组前期研究结果一致[12,13].

Tap是一种属于ATP结合匣超家族的转运蛋白, 由Tap1和Tap2两个亚单位组成, 并以异二聚体的形式发挥作用, Tap2基因多态性与多种恶性肿瘤的发生相关, 且其与汉族食管癌存在相关性[5]. 本研究采用PCR-RFLP技术对食管癌组与对照中的Tap2基因多态性进行检测, 结果显示: Tap2379为哈族食管癌的危险因素(χ2 = 11.604, P = 0.001), 与本课题组前期研究结果一致[14]; Tap2665是哈族食管癌的危险因素(χ2 = 4.451, P = 0.035), 与本课题组前期研究结果有所不同, 其可能的原因是: HPV检测需要用到食管黏膜组织, 考虑到伦理道德, 对照不可能都是正常人群, 本课题的对照有一部分是门诊胃镜检查患有胃炎等消化系炎症的患者, 可能因此导致食管癌组及对照组之间的基因多态性的差异变小; Tap2687未发现有此作用(χ2 = 0.586, P = 0.444), 其原因可能是: 肿瘤细胞在与宿主的相互作用中, 为求生存可建立一系列免疫逃避机制以抵抗机体免疫系统的攻击.

研究发现, 免疫相关基因与HPV感染机体后的病毒清除过程有关, Cao等[5]研究显示HLA-Ⅱ类基因区的LMP7/Tap2基因多态性与安阳地区HPV相关食管癌有关, 并推测宿主的某些免疫相关基因将影响宿主对HPV病毒的清除, 而导致细胞恶性转化. 本研究交互作用显示: HPV16E6阳性与Tap2379、Tap2665基因多态性不存在交互作用, 可能是由于本课题的对照有一部分是门诊胃镜检查患有胃炎等消化系炎症的患者, 从而导致食管癌组及对照组之间的差异变小, 掩盖了他们之间的真实关系; Tap2379与Tap2665基因多态性存在交互作用, Tap2379、Tap2665两者均为阳性的个体发生食管癌的危险性为两因素均为阴性者的7.005倍(95%CI: 2.725-18.008), 其共同作用远大于两因素单独作用之和[单独Tap2379基因多态阳性的个体发生食管癌的风险为2.397(95%CI: 1.105-5.202), 单独Tap2665基因多态阳性的个体发生食管癌的风险为1.621(95%CI: 0.878-2.994)], 其原因可能是: Tap2379及Tap2665是Tap2基因座上相邻的两个多态位点, 在抗原呈递时, Tap2379及Tap2665单独的多态改变均会使Tap表达下降或功能障碍, 使得抗原结合槽无法形成, 当Tap2379及Tap2665共同作用时, Tap表达下降或功能上的障碍发生叠加, 此时, Tap上的ATP酶就在大程度上无法被激活, Tap二聚体结构也不会发生改变, 跨膜通道不开放的个数增加, 胞质侧的抗原肽被转位于内质网腔内的个数减少[15], 与内质网中新合成组装完整的MHC-Ⅰα/β2m分子上的肽结合沟槽结合个数也减少, 形成稳定的MHC-Ⅰ抗原肽复合物的个数也必然减少. 使其无法经分泌途径表达于APC表面, 无法被CD8+ T淋巴细胞识别从而引起免疫应答, 导致肿瘤抗原被有效转运的作用降低, 故使肿瘤逃逸免疫监视的效应增强. 但HPV与免疫相关基因遗传多态性的共同致癌机制仍需进一步深入研究, 为食管癌的防治提供确切的生物学依据.

评论
背景资料

人乳头瘤病毒(HPV)的E6、E7原癌蛋白可引起食管细胞永生化, 这可能是食管癌发生的危险因素之一; 人类白细胞抗原(HLA)-Ⅱ类基因区的LMP7/Tap2基因多态性与安阳地区HPV相关食管癌有关, 并推测宿主的某些免疫相关基因将影响宿主对HPV病毒的清除, 而导致细胞恶性转化.

同行评议者

王健生, 教授, 西安交通大学医学院第一附属医院肿瘤外科

研发前沿

食管癌病因及发病学机制至今尚未完全阐明, 目前认为这是环境因素和遗传因素共同作用的结果. 食管癌的病因可归结为致癌物活化或解毒作用、DNA修复能力、HPV感染和其他已知或未知因素产生的联合作用. 国内外研究结果表明高危型HPV感染与高发区食管癌发生关系密切. 因此, 食管癌与HPV感染及其与免疫相关基因之间的相互关系是一个值得研究的问题.

相关报道

Furumoto等研究发现HPV感染宿主细胞后的致癌作用与HPV DNA整合入宿主细胞有关. 许春雷等采用免疫组织化学法对食管癌的研究表明, HPV16E6、E7蛋白在食管癌组织中的表达要高于正常食管黏膜组织.

创新盘点

本研究在前期HPV16E6、HLADR9、Tap2基因多态性与新疆哈萨克族人群食管癌关系的研究基础之上, 进一步探讨了HPV16E6、Tap2与新疆哈萨克族食管癌交互作用, 对于了解HPV在食管癌的发生中的可能致癌机制具有一定的意义.

应用要点

本研究从分子水平分析HPV感染与Tap2基因遗传多态性的关系及其相互间的交互作用, 为食管癌的防治提供有价值的参考依据.

同行评价

本文可读性和科学性较好, 对于了解HPV在食管癌发生中的可能致癌机制具有一定的意义.

编辑 李薇 电编 何基才

1.  Furumoto H, Irahara M. Human papilloma virus (HPV) and cervical cancer. J Med Invest. 2002;49:124-133.  [PubMed]  [DOI]
2.  Sashiyama H, Shino Y, Sakao S, Shimada H, Kobayashi S, Ochiai T, Shirasawa H. Alteration of integrin expression relates to malignant progression of human papillomavirus-immortalized esophageal keratinocytes. Cancer Lett. 2002;177:21-28.  [PubMed]  [DOI]
3.  许 春雷, 千 新来, 周 小山, 赵 清正, 李 艳春. HPV16E6型-E6、E7在食管鳞癌组织与非癌组织中的表达. 癌症. 2004;23:165-168.  [PubMed]  [DOI]
4.  叶 先仁. 抗原加工转运蛋白与免疫逃避. 福建医药杂志. 2003;25:133-135.  [PubMed]  [DOI]
5.  Cao B, Tian X, Li Y, Jiang P, Ning T, Xing H, Zhao Y, Zhang C, Shi X, Chen D. LMP7/TAP2 gene polymorphisms and HPV infection in esophageal carcinoma patients from a high incidence area in China. Carcinogenesis. 2005;26:1280-1284.  [PubMed]  [DOI]
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8.  夏 天, 郝 妍, 王 小华, 刘 洋, 陈 兆鹏, 沈 锡中, 朱 乃硕. 抗原肽运载体TAP2基因与乙型肝炎病毒感染预后的相关性研究. 中华微生物学和免疫学杂志. 2005;25:331-337.  [PubMed]  [DOI]
9.  张 伟, 李 艳红, 王 兴国, 刘 节, 赵 建业, 苏 勤. HPV16E6、18E6、c-erbB-2及p21ras基因蛋白的表达与宫颈癌的关系. 诊断病理学杂志. 2000;7:196.  [PubMed]  [DOI]
10.  邹 赛英, 刘 旭明, 唐 新萍, 司 静懿. 食管鳞癌HPV感染与病毒致癌基因E6的关系. 临床与实验病理学杂志. 1998;14:50-52.  [PubMed]  [DOI]
11.  刘 文康, 张 美萍, 张 镇西, 楚 雍烈. 食管鳞癌中人乳头瘤病毒16型E6、E7和细胞特异性增强子片段的检测. 现代肿瘤医学. 2009;17:878-881.  [PubMed]  [DOI]
12.  陈 云昭, 姚 恩生, 杨 兰, 刘 春霞, 李 洪安, 蒋 金芳, 秦 江梅, 杨 磊, 李 锋. 人乳头状瘤病毒感染与新疆哈萨克族食管癌发生关系的探讨. 现代预防医学. 2008;35:2407-2409.  [PubMed]  [DOI]
13.  廖 佩花, 秦 江梅, 曾 同霞, 李 锋, 蔡 金凤, 何 玲. HPV16E6、HLA-DR9与新疆哈萨克族人群食管癌交互作用的1∶2病例对照研究. 中华流行病学杂志. 2009;30:951-954.  [PubMed]  [DOI]
14.  曾 同霞, 张 海峰, 雷 丽娟, 蔡 金凤, 李 锋, 廖 佩花, 秦 江梅. TAP2基因多态性及遗传因素与新疆哈萨克族食管癌的相关性. 世界华人消化杂志. 2009;17:3255-3258.  [PubMed]  [DOI]
15.  Reits EA, Griekspoor AC, Neefjes J. How does TAP pump peptides? insights from DNA repair and traffic ATPases. Immunol Today. 2000;21:598-600.  [PubMed]  [DOI]