抑癌基因PTEN及P16蛋白在疣状胃炎及胃癌组织中的表达及意义

摘要

目的: 探讨疣状胃炎与胃癌之间的关系.

方法: 采用免疫组织化学法检测PTEN及P16蛋白在慢性浅表性胃炎、疣状胃炎及胃癌组织中的表达.

结果: 疣状胃炎组PTEN蛋白阳性率显著低于慢性浅表性胃炎组(44.4% vs 92%, χ² = 14.47, P<0.01), 而与胃癌组(25.8%)比较无显著差异(χ² = 2.51, P>0.05). 疣状胃炎组P16蛋白阳性率显著低于慢性浅表性胃炎组(50% vs 96%, ^χ2 = 14.56, P<0.01), 但明显高于胃癌组(19.4%)(χ² = 6.80, P<0.01).

结论: 抑癌基因PTEN及P16可能参与了疣状胃炎癌变过程.

关键词: 疣状胃炎; 胃癌; PTEN蛋白; P16蛋白

Expression of PTEN and P16 proteins in varioliform gastritis and gastric cancer

Shi-Hua Ding, Jun Liu, Qing Shu, Jian-Ping Wang, Lian-Min Deng, Xin-Min Liu

Shi-Hua Ding, Jun Liu, Qing Shu, Jian-Ping Wang, Lian-Min Deng, Xin-Min Liu, Department of gastroenterology, Shenzhen Second Hospital, Shenzhen 518035, Guangdong Province, China

Supported by: the Foundation of Science Technology Bureau Of Shenzhen, No. 200902042

Correspondence to: Professor Jun Liu, Department of Gastroenterology, Shenzhen Second Hospital, Shenzhen 518035, Guangdong Province, China. shding123@163.com

Received: February 7, 2010
Revised: May 3, 2010
Accepted: May 18, 2010
Published online: July 8, 2010

Abstract

AIM: To explore the relationship between varioliform gastritis and gastric cancer.

METHODS: The expression of PTEN and P16 proteins in chronic superficial gastritis, varioliform gastritis and gastric cancer was detected by immunohistochemistry.

RESULTS: The positive rate of PTEN protein expression in varioliform gastritis was significantly lower than that in chronic superficial gastritis (44.4% vs 92%, χ² = 14.47, P < 0.01) though no significant difference was noted between varioliform gastritis and gastric cancer (44.4% vs 25.8%, χ² = 2.51, P > 0.05). The positive rate of P16 protein expression in varioliform gastritis was significantly lower than that in chronic superficial gastritis (50% vs 96%, χ² = 14.56, P < 0.01), but significantly higher than that in gastric cancer (50% vs 19.4%, χ² = 6.80, P < 0.01).

CONCLUSION: Both PTEN and P16 proteins may be involved in the evolution of varioliform gastritis to gastric cancer.

Key Words: Varioliform gastritis; Gastric cancer; PTEN; P16

0 引言

疣状胃炎(varioliform gastritis)是一种特殊类型的慢性胃炎, 又称隆起糜烂性胃炎. 临床表现缺乏特异性, 主要依靠胃镜诊断. 在内镜下可分为分为成熟型和未成熟型两型, 在病理学上存在一定比例的肠上皮化生和不典型增生. 少数临床研究[1,2]观察到疣状胃炎可发生癌变, 但其与胃癌的关系尚不明确, 癌变的分子机制尚不清楚. 本研究通过免疫组织化学法检测抑癌基因PTEN及P16蛋白在疣状胃炎、胃癌组织中的表达, 探讨疣状胃炎与胃癌之间的关系.

1 材料和方法

1.1 材料

收集我院病理科2009-01/2009-12胃镜活检和手术切除标本蜡块92例, 其中慢性浅表性胃炎25例、疣状胃炎36例、胃癌31例. 主要试剂PTEN及P16鼠抗人单抗, 通用二部法免疫组织化学检测试剂及DAB显色试剂盒均购自上海生工生物工程有限公司.

1.2 方法

石蜡切片脱蜡至水, 用高压抗原修复法进行预处理; 3% H₂O₂去离子水孵育5 min, 以阻断内源性过氧化物酶, PBS 冲洗, 滴加一抗, 4 ℃过夜, PBS 冲洗2 min, 共3次; 滴加通用型IgG 抗体, 室温30 min, PBS冲洗2 min, 共2次, DAB溶液显色; 蒸馏水冲洗、复染、脱水、封片. PBS代替一抗作为阴性对照. 免疫组织化学染色结果判定: 细胞质或细胞核着棕黄色者为阳性染色, 每例随机观察10个高倍视野(×200), 计算阳性细胞百分率, 阳性细胞数≥5%为阳性染色, <5%或缺乏者为阴性染色.

统计学处理 计算各组的阳性率, 采用χ²检验, P<0.05为有统计学意义.

2 结果

疣状胃炎组PTEN蛋白阳性率显著低于慢性浅表性胃炎组(44.4% vs 92%, χ² = 14.47, P<0.01), 而与胃癌组(25.8%)比较无显著差异(χ² = 2.51, P>0.05). 疣状胃炎组P16蛋白阳性率显著低于慢性浅表性胃炎组(50% vs 96%, χ² = 14.56, P<0.01), 但明显高于胃癌组(19.4%)(χ² = 6.80, P<0.01, 图 1, 2).

3 讨论

胃癌的发生、发展是一个多因素、多基因作用的复杂过程, 与癌基因的激活和抑癌基因的失活密切相关[3-5]. 抑癌基因PTEN基因定是位于染色体10q23.3的肿瘤抑制基因, 编码PTEN蛋白, 参与氨酸磷酸酶和丝氨酸/苏氨酸磷酸酶介导的信号传导过程, 使第二信使PIP3去磷酸化, 从而抑制细胞生长和凋亡, 在多种肿瘤中频发突变和缺失. Gou等[6]研究发现PTEN基因可在4个位点发生突变, 胃癌组织中PTEN蛋白表达率为66%明显低于癌旁组织(100%). Kang等[7]分析310例胃癌PTEN基因表达变化, 62例无PTEN表达, 而且PTEN的表达与肿瘤深度、大小、进展阶段相关. 进一步研究还发现PTEN基因通过刺激血管生成参与了胃癌的转移[8]并与胃癌患者的生存期密切相关[9]. 由此可见, PTEN基因失活参与了胃癌的发生和发展. 本研究显示疣状胃炎组、胃癌组PTEN蛋白阳性率分别为44.4%、25.8%均显著低于慢性浅表性胃炎组92%, 而疣状胃炎组与胃癌组比较无显著差异. 表明疣状胃炎组织中已有PTEN基因失活, 具有发展成胃癌的可能.

p16基因定位染色体9q21, 编码相对分子质量为16 kDa的P16蛋白, 特异性抑制细胞周期蛋白依赖性激酶4和6活性, 调控细胞周期, 参与了人类多种肿瘤的发生和发展, 故又称多种肿瘤抑制基因. p16基因失活形式包括纯和性缺失、突变、异常甲基化和表达下降. 多项研究[^10-13]表明胃癌组织中均有p16基因启动子超甲基化和P16蛋白表达降低, 并与胃癌组织类型、分化程度及转移密切相关. Jang等[14]用甲基化特异性PCR法检测了46例胃癌及癌旁组织中p16基因, 发现43%的胃癌及59%的胃癌旁组织有p16基因启动子超甲基化, 在癌旁组织中p16基因启动子超甲基化与慢性炎症的程度、腺体萎缩密切相关, 由此认为p16基因表达缺失可能是胃癌发生中的早期事件. Mino等[15]报道良性胃疾病行胃切除术后发生的残胃癌组织中p16基因启动子超甲基化高达69%, 明显高于异时胃癌和原发性胃癌, p16基因表达失活可能是残胃癌发生的分子机制之一. 本组资料显示疣状胃炎组P16蛋白阳性率50%显著低于慢性浅表性胃炎组96%, 但明显高于胃癌组(19.4%). 研究结果表明P16参与了胃癌的发生, 疣状胃炎可能是胃黏膜组织癌变的中间阶段. 总之疣状胃炎具有癌变的潜能, 机体内存在慢性浅表性胃炎→疣状胃炎→胃癌的过程, 抑癌基因PTEN及P16失活可能是其分子机制之一.

评论

背景资料

疣状胃炎在内镜下可分为成熟型和未成熟型两型, 在病理学上存在一定比例的肠上皮化生和不典型增生. 少数临床研究观察到疣状胃炎可发生癌变, 但其与胃癌的关系尚不明确.

同行评议者

曹秀峰, 教授, 南京医科大学附属南京第一医院肿瘤中心; 关玉盘, 教授, 首都医科大学附属北京朝阳医院消化科

研发前沿

疣状胃炎是否会癌变及其癌变的分子机制是目前的研究热点.

相关报道

宋莹等用免疫组织化学检测癌基因P21、P53蛋白的表达, 发现疣状胃炎的表达高于慢性浅表性胃炎, 且H.pylori阳性高于H.pylori阴性者.

同行评价

本研究方法设计合理, 论述清楚, 结论可靠, 具有一定的基础与临床研究价值.

备注

编辑 李军亮 电编 吴鹏朕

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