修回日期: 2006-11-01
接受日期: 2006-11-03
在线出版日期: 2007-02-08
目的: 研究E-cadherin, b-catenin, Cyclin D1在胃腺癌组织中的表达, 探讨三者的表达及临床病理意义.
方法: 采用免疫组织化学SP法检测73例胃腺癌组织及18例正常胃黏膜组织中E-cadherin, b-catenin, Cyclin D1蛋白的表达.
结果: 正常胃黏膜组织中E-cadherin和b-catenin均呈清晰的棕褐色染色在上皮细胞细胞膜. E-cadherin和β-catenin在胃癌细胞中出现细胞质和/或细胞核异常染色, 其异常表达率分别为63.01%(46/73)和56.16%(41/73), 且两者的异常表达与胃腺癌的分化程度、TNM分期、浸润深度及淋巴结转移相关, 与患者的性别、年龄、肿瘤大小无关. 胃腺癌中E-cadherin和β-catenin表达密切相关. Cyclin D1在胃腺癌组织中的阳性表达率为67.12%(49/73), 明显高于其在正常胃黏膜组织中的表达(0%, 0/18), 且与胃腺癌的分化程度和淋巴结转移相关. E-cadherin和β-catenin在胃癌中的异常表达与Cyclin D1的过表达呈显著的正相关(r = 0.249, r = 0.376, P<0.05).
结论: 胃腺癌中存在E-cadherin和β-catenin基因的失活及蛋白表达下调. E-cadherin和β-catenin的异常表达可能通过促使或激活Cyclin D1的过表达而参与胃癌的发生和发展.
引文著录: 王渝, 柯昌庶, 赵秋, 马松林, 龚勇, 杨芳. E-cadherin, β-catenin, Cyclin D1在胃腺癌中的表达及临床意义. 世界华人消化杂志 2007; 15(4): 403-407
Revised: November 1, 2006
Accepted: November 3, 2006
Published online: February 8, 2007
AIM: To investigate the expression of E-cadherin, β-catenin and Cyclin D1 and their relationships and clinical pathological features in gastric adenocarcinoma.
METHODS: Immunohistochemical SP method was used to determine the expression of E-cadherin, β-catenin and Cyclin D1 protein in 73 cases of gastric adenocarcinoma tissues and 18 cases of normal gastric mucosal tissues.
RESULTS: Positive staining for E-cadherin and β-catenin was observed on the cellular membrane of epithelial cells in normal gastric mucosal tissues. The aberrant expression of E-cadherin and β-catenin were observed in the cytoplasm and/or cellular nucleus of gastric cancer cells. The aberrant expression rates of E-cadherin and b-catenin were 63.01% (46/73) and 56.16% (41/73) in gastric adenocarcinoma, respectively, which were associated with the differentiation degree, TNM stages, depth of infiltration and lymph node metastasis, but not with the gender, age and tumor size. There was a significant correlation between E-cadherin and b-catenin expression in gastric adenocarcinoma. The positive rate of Cyclin D1 expression was 67.12% (49/73) in gastric adenocarcinoma, notably higher than that in normal gastric tissues (0/18, P < 0.01), and it was correlated with the differentiation degree and lymph node metastasis. The aberrant expression of E-cadherin and b-catenin were positively correlated with the high expression of Cyclin D1 gastric carcinoma (r = 0.249, 0.376, both P < 0.05).
CONCLUSION: Down-regulated expression of E-cadherin and β-catenin exist in gastric carcinoma, which may promote the pathogenesis and development of carcinoma by activation of Cyclin D1.
- Citation: Wang Y, Ke CS, Zhao Q, Ma SL, Gong Y, Yang F. Expression of E-cadherin, β-catenin and Cyclin D1 in gastric adenocarcinoma and their clinical significances. Shijie Huaren Xiaohua Zazhi 2007; 15(4): 403-407
- URL: https://www.wjgnet.com/1009-3079/full/v15/i4/403.htm
- DOI: https://dx.doi.org/10.11569/wcjd.v15.i4.403
E-cadherin是维持上皮细胞的极性及细胞间黏附连接的主要分子, 在Ca2+的参与下介导上皮细胞间的黏附. E-cadherin发挥细胞间黏附作用须与细胞内的连环蛋白(α-catenin, β-catenin, γ-catenin)结合形成钙黏附素连环素复合体(E-cad/cat). 在catenin家族中以β-catenin与肿瘤的关系最为密切, β-catenin异常可导致E-cad/cat复合体结构破坏和功能障 碍, 并在肿瘤的浸润转移过程中发挥重要作用[1]. β-catenin除与E-cadherin结合介导细胞黏附反应外, 还参与Wnt信号转导通路激活Cyclin D1, c-myc等癌基因, 与肿瘤发生密切相关[2]. 本研究采用免疫组织化学检测73例胃癌组织中E-cadherin, β-catenin和Cyclin D1的表达及其相关性, 探讨三者在胃腺癌组织中表达及临床病理意义.
收集同济医学院附属同济医院2004-01/2006-06手术切除的胃癌标本73例, 其中男48例, 女25例, 年龄42-71(平均56.4)岁. 肿瘤大小: 直径≤5 cm, 44例; 直径>5 cm, 29例. 淋巴结转移: 阳性者23例, 阴性者50例. TNM分期: Ⅰ-Ⅱ期31例, Ⅲ-Ⅳ期42例. 分化程度: 按WHO分类, 高分化腺癌8例, 中分化腺癌18例, 低分化腺癌47例. 所有标本均经40 g/L缓冲中性福尔马林液固定, 常规石蜡包埋, 5 μm厚度连续切片, 1片行HE染色, 另3片制成涂胶白片作免疫组化用. 另取18例正常胃黏膜标本做对照. 兔抗人E-cadherin, β-catenin多克隆抗体购自武汉博士德生物工程有限公司, 鼠抗人Cyclin D1 mAb购自Sant Cruz公司, 免疫组化SP试剂盒和DAB显色试剂盒均购自北京中山生物技术有限公司.
采用免疫组织化学SP法对胃癌组织中E-cadherin, β-catenin及Cyclin D1蛋白的表达进行检测. 实验步骤严格按照试剂盒说明书操作, 石蜡切片经脱蜡, 梯度酒精水化后, 用30 mL/L H2O2甲醇室温孵育15 min, 0.01 mol/L(pH6.0)枸橼酸盐缓冲液微波修复抗原15 min, 加入50 mL/L山羊血清孵育20 min后再分别加入一抗(工作浓度为1:100)4℃过夜, 再分别加二抗和链霉素过氧化酶孵育20 min, DAB显色, 苏木素复染, 封片, 镜检. 用阳性切片在相同条件下染色作为阳性对照, 用PBS代替一抗作为阴性对照. E-cadherin和β-catenin的正常染色主要定位于腺上皮细胞膜, 以沿细胞膜分布呈棕褐色细小颗粒状连续性着色即连续的细胞膜染色为阳性. 染色结果判断标准参照文献[3]方法: 将染色记为0-3分. 0分: 细胞膜、胞质均未染色; 1分: 细胞质染色为主; 2分: 异质性染色(细胞膜、胞质混合染色); 3分: 连续的细胞膜染色. 无连续的细胞膜染色被视为异常, 即0-2分为异常表达. Cyclin D1以上皮细胞核出现棕褐色颗粒为阳性染色. 每张切片随机选取5个高倍视野, 以阳性细胞核>10%细胞总数为阳性, 反之为阴性.
统计学处理 采用SPSS13.0 for Windows统计软件包进行χ2检验及Spearman等级相关分析, P<0.05为有统计学意义.
正常胃黏膜上皮细胞E-cadherin和β-catenin表达呈强阳性, 表达部位相似, 主要定位于细胞膜及细胞间质, 呈黄色网格状分布, 均匀一致, 细胞质和细胞核表达阴性. 胃腺癌组织中癌细胞E-cadherin和β-catenin细胞膜表达减弱, 呈现同质性和/或异质性染色, 出现细胞质阳性异常染色或以细胞质为主的混合性染色以及完全阴性染色. 在73例胃癌组织中, E-cadherin和β-catenin的异常表达率分别为63.01%(46/73)和56.16%(41/73)(表1). E-cadherin和β-catenin在TNM分期Ⅲ-Ⅳ期、高-中分化腺癌、有浆膜浸润及淋巴结转移者中表达阳性率分别低于TNM分期Ⅰ-Ⅱ期、低分化腺癌、无浆膜浸润及淋巴结转移者, 差异有显著性统计学意义(表2).
| 分组 | n | E-cadherin | P值 | β-catenin | P值 | Cyclin D1 | P值 | |||
| 正常(%) | 异常(%) | 正常(%) | 异常(%) | 阴性(%) | 阳性(%) | |||||
| 正常胃黏膜组织 | 18 | 18(100) | 0(0) | <0.01 | 18(100) | 0(0) | <0.01 | 0(0) | 18(100) | <0.01 |
| 胃癌 | 73 | 27(36.99) | 46(63.01) | 32(43.84) | 41(56.16) | 24(33.88) | 49(67.12) | |||
| 临床病理特征 | n | E-cadherin表达 | β-catenin表达 | Cyclin D1表达 | |||||||
| 异常(%) | 正常(%) | P值 | 异常(%) | 正常(%) | P值 | 阴性(%) | 阳性(%) | P值 | |||
| 年龄 | ≤55岁 | 26 | 14(53.85) | 12(46.15) | >0.05 | 18(69.23) | 8(30.77) | >0.05 | 10(38.46) | 16(61.54) | >0.05 |
| >55岁 | 47 | 32(68.09) | 15(31.91) | 23(48.94) | 24(51.06) | 14(29.79) | 33(70.21) | ||||
| 性别 | 男 | 48 | 31(64.58) | 17(35.42) | >0.05 | 25(52.08) | 23(47.92) | >0.05 | 18(37.50) | 30(62.50) | >0.05 |
| 女 | 25 | 15(60.00) | 10(40.00) | 16(64.00) | 9(36.00) | 6(24.00) | 19(76.00) | ||||
| 肿瘤大小 | ≤5 cm | 44 | 28(63.64) | 16(36.36) | >0.05 | 25(56.82) | 19(43.18) | >0.05 | 15(34.09) | 29(65.91) | >0.05 |
| >5 cm | 29 | 18(62.07) | 11(37.93) | 16(55.17) | 13(44.83) | 9(31.03) | 20(68.97) | ||||
| 分化程度 | 高-中分化腺癌 | 26 | 9(34.62) | 17(65.38) | <0.01 | 5(19.23) | 21(80.77) | <0.01 | 15(57.69) | 11(42.31) | <0.01 |
| 低分化腺癌 | 47 | 37(78.72) | 10(21.28) | 36(76.60) | 11(23.40) | 9(19.15) | 38(80.85) | ||||
| 淋巴结转移 | 有 | 23 | 19(82.61) | 4(17.39) | <0.05 | 18(78.26) | 5(21.74) | <0.05 | 12(52.17) | 11(47.83) | <0.05 |
| 无 | 50 | 27(54.00) | 23(46.00) | 22(44.00) | 28(56.00) | 12(24.00) | 38(76.00) | ||||
| 浸润深度 | 未侵及浆膜 | 41 | 20(48.78) | 21(51.22) | <0.05 | 17(41.46) | 24(58.54) | <0.01 | 17(41.46) | 24(58.54) | >0.05 |
| 侵及浆膜 | 32 | 26(81.25) | 6(18.75) | 24(75.00) | 8(25.00) | 7(21.88) | 25(78.12) | ||||
| TNM分期 | Ⅰ-Ⅱ期 | 31 | 12(38.71) | 19(61.29) | <0.01 | 9(29.03) | 22(70.97) | <0.01 | 9(29.03) | 22(70.97) | >0.05 |
| Ⅲ-Ⅳ期 | 42 | 34(80.95) | 8(19.05) | 32(76.19) | 10(23.81) | 15(35.71) | 27(64.29) | ||||
Cyclin D1阳性产物为棕褐色颗粒, 主要定位于细胞核. 正常胃黏膜上皮细胞中Cyclin D1阴性表达. Cyclin D1在73例胃癌组织内的阳性表达率为67.12%(49/73), 显著高于其在正常胃黏膜组织中的表达(表1). 在不同分化程度的胃癌组织中, Cyclin D1蛋白的阳性表达率分别为: 高-中分化腺癌42.31%(11/26), 低分化腺癌80.85%(38/47); 两者比较, 差异有显著性(P<0.01). 此外, Cyclin D1在伴淋巴结转移的胃癌组织中的阳性表达率(76.00%)明显高于其在不伴淋巴结转移的胃癌组织中的表达率(47.83%)(表2).
E-cadherin和β-catenin在胃癌中的表达具有一定的相关性(表3), 73例胃癌组织中E-cadherin和β-catenin均正常表达者为23.29%(17/73), E-cadherin和β-catenin均异常表达为42.47%(31/73), 两者的表达呈正相关(r = 0.295, P<0.05). 在E-cadherin正常表达的46例中, 35例(76.09%)有Cyclin D1的过表达; 而在27例E-cadherin表达减弱或缺少的病例中, 14例(51.85%)Cyclin D1过表达. E-cadherin表达下降与Cyclin D1的过表达间有着显著的正相关性(r = 0.249, P<0.05). β-catenin呈正常表达的41例中, 33例(80.49%)呈现Cyclin D1过表达; 而在β-catenin异常表达的32例中, 15例(46.88%)Cyclin D1呈过表达. β-catenin的异常表达与Cyclin D1的过表达间亦存在显著的正相关性(r = 0.376, P<0.01).
| E-cadherin | β-catenin | P值 | r | |
| 正常(%) | 异常(%) | |||
| 正常(%) | 17(62.96) | 10(33.04) | <0.05 | 0.295 |
| 异常(%) | 15(32.61) | 31(67.39) | ||
E-cadherin是一类介导细胞之间互相黏附的钙依赖性跨膜糖蛋白, 是细胞黏附功能的执行者, 其功能是介导细胞与细胞之间的黏附, 维持细胞结构和形态的稳定. E-cadherin以分子的胞质末端与连环蛋白(α-catenin, β-catenin, γ-catenin)及肌动蛋白细胞骨架结合形成钙黏附素连环素复合体(E-cad/cat), 不仅介导细胞黏附, 还直接和间接的参与细胞的信号传导, 与肿瘤的侵袭和转移行为密切相关[4-6]. E-cadherin主要介导同型细胞的黏附功能, 其阳性表达有抑制肿瘤转移的功能, E-cadherin表达下降或缺失, 会导致细胞间的相互黏附力下降, 从而使细胞易于分散而向外周浸润性生长; 一旦获得转移的必要条件, 便可脱离原发灶而发生转移[7-8], 这种现象已在多种肿瘤如肺癌、乳腺癌、大肠癌、肝癌、胃癌等的研究中得到证实[9-14]. catenin家族中的成员β-catenin是一种连接蛋白, 其编码基因突变、蛋白表达异常及异位与肿瘤发生或转移密切相关. 作为细胞黏附分子重要组成部分的E-cadherin和β-catenin基因, 在肿瘤分化和转移过程中有着重要的作用, 是肿瘤浸润转移的抑制因子, 他们中的任何一种成分异常均可导致E-cadherin介导的细胞黏附系统功能障 碍. E-cadherin下调或β-catenin自身功能变化都可能造成E-cad/cat复合体的功能降低或丧失, 使β-catenin由胞膜游离而进入胞质和核, 而核内β-catenin的水平升高可以活化靶基因, 启动细胞周期, 促进细胞增生, 最终导致肿瘤的发生. E-cadherin及β-catenin的异常表达不仅与细胞分化相关, 还与肿瘤的浸润及转移密切相关. 大量研究表明[15], E-cad/β-cat复合物具有抑制肿瘤浸润与转移的作用, E-cadherin表达强度与组织学分级、肿瘤大小、淋巴转移、临床分期和静脉侵犯呈负相关[16]. Behrens et al发现, E-cadherin黏附功能的丧失可使细胞转为高侵袭性表型, 进一步研究表明, 在多种肿瘤组织中, 包括肝癌、胃癌、胰腺癌、前列腺癌、膀胱癌及结直肠癌等, 都发现有E-cadherin表达的异常, 特别是在肿瘤的转移灶中, 癌细胞E-cadherin的表达减少甚至消失[17-18]. 本研究显示, E-cadherin和β-catenin在胃癌细胞的细胞膜表达与正常胃黏膜上皮细胞相比明显降低, 并出现细胞质和/或细胞核等各种形态的异常表达. 随着胃癌分化程度的降低、浸润深度的增加、TNM分期的进展以及淋巴结转移的发生, E-cadherin和β-catenin的异常表达明显增加; 且E-cadherin和β-catenin在胃癌中的表达强度呈密切正相关(r = 0.295, P<0.05). 由此推测, 由于β-catenin基因突变或E-cad/β-cat复合体的解体, 使得E-cadherin失去与β-catenin的锚定连接而形成一种活动形式, 加之E-cadherin和β-catenin表达减少, 细胞失去黏附功能, 导致细胞分散, 癌细胞表型改变, 获得高侵袭性, 易于发生浸润和转移, 这些因素在胃癌的进展中均起重要作用, 看来二者有一定协同作用.
β-catenin是一种多功能蛋白, 除了结合型β-catenin可与E-cadherin结合形成E-cad/β-cat复合体外, 游离型β-catenin是Wnt信号通路重要组成部分, 可介导Wnt信号转导通路的异常激活, 这两种作用均与肿瘤的发生、发展密切相关[3,19-20]. 当β-catenin蛋白本身异常或者降解途径异常时, 激活Wnt信号传导途径, β-catenin进入核内与转录调控因子TCF/LEF家族成员结合, 继而激活下游靶基因Cyclin D1, c-myc, 导致肿瘤的发生[21]. 当Cyclin D1表达失控时会引起细胞增殖周期失调[22]. 近年的研究发现, 胃癌的发生、发展与Cyclin D1的表达有着较为密切的关系, 夏加增 et al[23]的研究证实, Cyclin D1在不同胃癌组织中的表达增强, 他们认为Cyclin D1过度表达引起胃癌细胞异常增殖. 本研究显示, Cyclin D1在胃癌组织中的阳性表达率为67.12%(49/73), 明显高于其在正常胃黏膜组织中的表达, 且Cyclin D1的过表达与胃癌的分化程度和淋巴结转移密切相关. 正常胃黏膜组织中E-cadherin和β-catenin均为细胞膜强阳性表达, 细胞质和细胞核几乎不着色, 而E-cadherin和β-catenin在胃癌组织中大多数表现为细胞质和/或细胞核内聚集表达, 胞膜表达消失. 本研究证明, 胃癌中E-cadherin和β-catenin的异常表达与Cyclin D1的过表达之间存在着显著的正相关(P<0.05). 结果提示, E-cadherin和β-catenin异常表达与Cyclin D1的激活相关, 继之细胞增殖和分化失控, 这一过程可能在胃癌的发生过程中发挥重要作用.
总之, E-cadherin和β-catenin在胃腺癌组织中存在异常的胞质和/或胞核表达, 异常表达的E-cadherin和β-catenin与胃癌的浸润和转移密切相关, 其作用可能通过Cyclin D1基因激活机制而实现.
作为细胞黏附分子重要组成部分的E-cadherin和 β-catenin基因, 在肿瘤分化和转移过程中有着重要的作用, 是肿瘤浸润转移的抑制因子, 他们中的任何一种成分异常均可导致E-cadherin介导的细胞 黏附系统功能障碍. β-catenin除与 E-cadherin结合介导细胞黏附反应外, 还参与Wnt信号转导通路激活Cyclin D1, c-myc等癌基因, 与肿瘤发生密切相关.
本文发现胃癌细胞中E-cadherin, β-catenin及CyclinD 1 表达异常升高, 与胃腺癌的分化程度、TNM分期、浸润深度及淋巴结转移有关, 提示他们在胃癌发生过程中起着重要的调节作用, 有临床参考价值.
电编:张敏 编辑:张焕兰
| 1. | Jawhari AU, Farthing MJ, Pignatelli M. The E-cadherin/epidermal growth factor receptor interaction: a hypothesis of reciprocal and reversible control of intercellular adhesion and cell proliferation. J Pathol. 1999;187:155-157. [PubMed] |
| 3. | Jawhari A, Jordan S, Poole S, Browne P, Pignatelli M, Farthing MJ. Abnormal immunoreactivity of the E-cadherin-catenin complex in gastric carcinoma: relationship with patient survival. Gastroenterology. 1997;112:46-54. [PubMed] |
| 4. | Yamaguchi A, Goi T, Seki K, Ohtaki N, Maehara M, Kobayashi T, Niimoto S, Katayama K, Hirose K, Nakagawara G. Clinical significance of combined immunohistochemical detection of CD44v and sialyl LeX expression for colorectal cancer patients undergoing curative resection. Oncology. 1998;55:400-403. [PubMed] |
| 5. | Bornman DM, Mathew S, Alsruhe J, Herman JG, Gabrielson E. Methylation of the E-cadherin gene in bladder neoplasia and in normal urothelial epithelium from elderly individuals. Am J Pathol. 2001;159:831-835. [PubMed] |
| 6. | Naito A, Iwase H, Kuzushima T, Nakamura T, Kobayashi S. Clinical significance of E-cadherin expression in thyroid neoplasms. J Surg Oncol. 2001;76:176-180. [PubMed] |
| 7. | Hirohashi S. Inactivation of the E-cadherin-mediated cell adhesion system in human cancers. Am J Pathol. 1998;153:333-339. [PubMed] |
| 8. | Shiozaki H, Tahara H, Oka H, Miyata M, Kobayashi K, Tamura S, Iihara K, Doki Y, Hirano S, Takeichi M. Expression of immunoreactive E-cadherin adhesion molecules in human cancers. Am J Pathol. 1991;139:17-23. [PubMed] |
| 9. | Elzagheid A, Algars A, Bendardaf R, Lamlum H, Ristamaki R, Collan Y, Syrjanen K, Pyrhonen S. E-cadherin expression pattern in primary colorectal carcinomas and their metastases reflects disease outcome. World J Gastroenterol. 2006;12:4304-4309. [PubMed] |
| 10. | Wu ZY, Zhan WH, Li JH, He YL, Wang JP, Lan P, Peng JS, Cai SR. Expression of E-cadherin in gastric carcinoma and its correlation with lymph node micrometastasis. World J Gastroenterol. 2005;11:3139-3143. [PubMed] |
| 11. | Kase S, Sugio K, Yamazaki K, Okamoto T, Yano T, Sugimachi K. Expression of E-cadherin and beta-catenin in human non-small cell lung cancer and the clinical significance. Clin Cancer Res. 2000;6:4789-4796. [PubMed] |
| 12. | Kowalski PJ, Rubin MA, Kleer CG. E-cadherin expression in primary carcinomas of the breast and its distant metastases. Breast Cancer Res. 2003;5:R217-222. [PubMed] |
| 13. | Cui J, Zhou XD, Liu YK, Tang ZY, Zile MH. Abnormal beta-catenin gene expression with invasiveness of primary hepatocellular carcinoma in China. World J Gastroenterol. 2001;7:542-546. [PubMed] |
| 14. | Inagawa S, Itabashi M, Adachi S, Kawamoto T, Hori M, Shimazaki J, Yoshimi F, Fukao K. Expression and prognostic roles of beta-catenin in hepatocellular carcinoma: correlation with tumor progression and postoperative survival. Clin Cancer Res. 2002;8:450-456. [PubMed] |
| 15. | Debruyne P, Vermeulen S, Mareel M. The role of the E-cadherin/catenin complex in gastrointestinal cancer. Acta Gastroenterol Belg. 1999;62:393-402. [PubMed] |
| 16. | Takayama N, Arima S, Haraoka S, Kotho T, Futami K, Iwashita A. Relationship between the expression of adhesion molecules in primary esophageal squamous cell carcinoma and metastatic lymph nodes. Anticancer Res. 2003;23:4435-4442. [PubMed] |
| 17. | Schuhmacher C, Becker KF, Reich U, Schenk U, Mueller J, Siewert JR, Hofler H. Rapid detection of mutated E-cadherin in peritoneal lavage specimens from patients with diffuse-type gastric carcinoma. Diagn Mol Pathol. 1999;8:66-70. [PubMed] |
| 18. | Nabeshima K, Inoue T, Shimao Y, Kataoka H, Koono M. Cohort migration of carcinoma cells: differentiated colorectal carcinoma cells move as coherent cell clusters or sheets. Histol Histopathol. 1999;14:1183-1197. [PubMed] |
| 19. | Ilyas M, Tomlinson IP. The interactions of APC, E-cadherin and beta-catenin in tumour development and progression. J Pathol. 1997;182:128-137. [PubMed] |
| 20. | Hasegawa T, Yokoyama R, Matsuno Y, Shimoda T, Hirohashi S. Prognostic significance of histologic grade and nuclear expression of beta-catenin in synovial sarcoma. Hum Pathol. 2001;32:257-263. [PubMed] |
| 21. | Le Marchand L, Seifried A, Lum-Jones A, Donlon T, Wilkens LR. Association of the cyclin D1 A870G polymorphism with advanced colorectal cancer. JAMA. 2003;290:2843-2848. [PubMed] |
| 22. | 张 晓晖, 黄 高升, 王 文亮. 细胞周期的网络调控系统cyclins-CDKs-CKIs及其与肿瘤的关系. 国外医学•肿瘤学分册. 1997;24:77-80. |