临床经验 Open Access
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世界华人消化杂志. 2007-12-18; 15(35): 3746-3748
在线出版日期: 2007-12-18. doi: 10.11569/wcjd.v15.i35.3746
树突状细胞治疗HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者的临床观察
司方明, 娄海山, 郑鹏远, 熊灵军, 范毅凯, 李俊红, 白经修
司方明, 郑鹏远, 熊灵军, 范毅凯, 白经修, 郑州大学第二附属医院消化科 河南省郑州市 450014
娄海山, 李俊红, 河南省许昌市人民医院感染科 河南省许昌市 461000
基金项目: 河南省卫生厅医学创新人才工程资助项目, No. 2004-45; 河南省科技厅科技攻关资助项目, No. 0324410006.
通讯作者: 郑鹏远, 450014, 河南省郑州市经八路2号, 郑州大学第二附属医院消化科. medp7123@yahoo.com
电话: 0371-65261035
收稿日期: 2007-08-06
修回日期: 2007-10-25
接受日期: 2007-11-11
在线出版日期: 2007-12-18

目的: 观察树突状细胞疫苗对HBeAg(-)慢性乙型肝炎的治疗效果. 

方法:  HBV抗原肽致敏的树突状细胞, 1次/mo sc于17例HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者, 6次后改为HBV抗原肽和乙肝免疫球蛋白各注射1次/mo, 连用6 mo. 每6月复查肝功能, 乙肝标志, HBV DNA定量及B超. 

结果: HBV DNA转阴5例(29.4%), HBV DNA下降2例(11.8%), 肝功能复常4例(23.5%).

结论:  HBV抗原肽冲击的树突状细胞疫苗可应用于HBeAg阴性慢性乙型肝炎的治疗.

关键词: 乙型肝炎病毒; 慢性乙型肝炎; 树突状细胞; 免疫治疗
引文著录: 司方明, 娄海山, 郑鹏远, 熊灵军, 范毅凯, 李俊红, 白经修. 树突状细胞治疗HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者的临床观察. 世界华人消化杂志 2007; 15(35): 3746-3748
Clinical observation of chronic hepatitis B patients with negative HBeAg following dendritic cell vaccine treatment
Fang-Ming Si, Hai-Shan Lou, Peng-Yuan Zheng, Ling-Jun Xiong, Yi-Kai Fan, Jun-Hong Li, Jing-Xiu Bai
Fang-Ming Si, Peng-Yuan Zheng, Ling-Jun Xiong, Yi-Kai Fan, Jing-Xiu Bai, Department of Gastroenterology, the Second Affiliated Hospital of Zhengzhou University, Zhengzhou 450014, Henan Province, China
Hai-Shan Lou, Jun-Hong Li, Department of Infectious Diseases, Xuchang People's Hospital, Xuchang 461000, Henan Province, China
Supported by: the Medical Innovation Talent Program of Health Department of Henan Province, No. 2004-45 and the Key Item of Science and Technology Department of Henan Province, No. 0324410006.
Correspondence to: Peng-Yuan Zheng, Department of Gastroenterology, the Second Affiliated Hospital of Zhengzhou University, 2 Jingba Road, Zhengzhou 450014, Henan Province, China. medp7123@yahoo.com
Received: August 6, 2007
Revised: October 25, 2007
Accepted: November 11, 2007
Published online: December 18, 2007

AIM: To investigate the efficacy of dendritic cell (DC) vaccines in chronic hepatitis B patients with negative HBeAg.

METHODS: HBV antigen-loaded dendritic cells (DCs) were injected into patients subcutaneously. After six times of treatment with an interval of one month, HBV antigen (86 μg) and HBV-Ig (200 iu) were injected. At the end of treatment, HBV-DNA level, HBV-markers and liver function were examined in the serum.

RESULTS: Of the 17 patients with negative HBeAg CHB, 5 cases initially positive for HBV-DNA became negative. In 2 initially positive cases, the HBV-DNA level was decreased, and in 4 initially positive patients, liver function tests revealed a return to normal.

CONCLUSION: HBsAg-pulsed DCs loaded with HBVIgG are effective in the treatment of CHB patients with negative HBeAg.

Key Words: Hepatitis B virus; Chronic hepatitis B; Dendritic cell; Immunotherapy
0 引言

我国三分之一的慢性乙型肝炎(CHB)为HBeAg 阴性, 且HBeAg(-)CHB患者在CHB中所占比例逐年上升. 其临床表现为HBsAg(+), HBV DNA(PCR法)为(+), 部分患者抗HBe(+), ALT异常或反复活动. HBeAg(-)CHB具有较高的向肝硬化、肝癌发展的倾向[1]. 对HBeAg(-)CHB的治疗以IFN、Peg IFNα-2a, 核苷类似物等药物为主, 但IFN不良反应较大, 疗效有限, 核苷类药物应用疗程难以确定, 长期应用均可诱发HBV耐药突变[2], 且长期用药费用较高. 以上这些因素皆影响抗病毒药物的广泛、合理应用. 故从CHB发病机制入手, 进一步探索以提高机体免疫功能为主的免疫治疗, 对CHB患者的治疗具有重要的临床价值[3]. 本文利用HBV抗原肽冲击致敏的树突状细胞(dendritic cell, DC)制成疫苗, 应用于HBeAg(-)CHB患者的治疗, 现将结果报道如下.

1 材料和方法
1.1 材料

健康人外周血分离单个核细胞, 体外培养、扩增, 于第5天收获DC[4]. 根据中华医学会传染病与寄生虫学分会、肝病学分会联合修订的"病毒性肝炎防治方案"(2000-09西安)和中华医学会肝病学分会与感染病学分会联合制订的"慢性乙型肝炎防治指南"(2005-12-11)[5], 选门诊轻型HBeAg(-)CHB患者17例(男13例, 女4例), 年龄20-45岁, 病程3-25年, HBV DNA( PCR法)定量<5×109拷贝/L. 其中2例感乏力、纳差、腹胀等不适, 余皆无自觉症状. 排除肝硬化及其他类型的肝炎病毒感染.

1.2 方法

每位患者每次sc HBV抗原肽86 μg致敏DC, 106/次, 1次/mo, 共6次为第1疗程. 第2疗程为HBV抗原肽86 μg sc, 乙肝免疫球蛋白200 U, im, 1次/mo, 共6 mo. 每疗程结束后, 每6个月复查乙肝标志、肝功、B超及HBV DNA(PCR法).

2 结果

治疗1年结束后单项病毒学应答为7例(41.2%), 其中HBV DNA转阴5例, HBV DNA下降2例, 10例(58.8%)无应答. 单项生化学应答中4例(23.5%)ALT恢复正常, 13例(76.5%)无应答. 但有2例出现总胆红素略升高, B超仍提示弥漫性肝损伤. 虽然ALT复常, 仍按无应答统计. 发生应答的时间一般出现在治疗结束后, 但也有延迟至治疗1年后才出现应答, 故本文统计时间持续至治疗结束1-2年后的资料. 治疗后应答反应大多可维持1年以上或更久, 但有1例因经常难以控制饮酒致ALT反复异常, HBV DNA定量不稳定而复发(表1).

表1 树突状细胞疫苗治疗HBeAg阴性慢性乙型肝炎17例应答情况.
诊断n单项应答时间顺序应答(治疗1年后)联合应答(治疗2年后)联合应答
病毒学生化学治疗结束时持久复发完全部分无完全部分无
HBeAg(-)慢乙肝177411101566467
3 讨论

CHB患者体内HBV持续存在不易清除的原因可能是机体免疫功能低下, 对感染的HBV形成免疫耐受所致[6]. 患者免疫功能缺陷的重要原因之一是其外周血中DC数量下降, 表型不成熟, 功能降低, 无法有效呈递HBV抗原肽, 不能诱发有效的特异的体液免疫和细胞免疫应答[7]. 利用HBsAg冲击致敏DC可使其成熟度提高, MHC、共刺激分子表达增加, 从而激活DC的抗原呈递功能及IL-12、IFNγ等Th1型细胞因子的分泌, 纠正CHB患者Th1/Th2细胞间的失衡, 诱发出HBV特异的CTL反应. 由于T细胞活化增殖, 也有利于其辅助B细胞增殖分化, 致特异性体液免疫增强, 有利于清除HBV[8-9]. 这为DC疫苗用于抗CHB治疗带来了希望.

从本文结果可以看出, HBsAg冲击的DC可用于HBeAg(-)CHB患者的治疗, 可使部分患者肝功能复常, HBV DNA下降或转阴. 这说明经治疗后患者免疫功能有所增强, 因为HBV复制的直接指标为HBV DNA水平, HBV DNA水平高低与机体免疫功能相关[10], HBV DNA水平下降示机体免疫功能提高. 推测其机制可能是HBsAg抗原肽冲击后DC成熟度增加, CD80、CD86、HLA-DR表达增强, IL-12分泌增加, 诱导Th1细胞分化, 增强CD8+ T细胞和NK细胞活性. IFNr分泌增加也可使CD4+ T细胞向Th1分化, 抑制Th2形成, 从而激活HBV特异的CTL克隆增殖, 杀伤HBV[11]. 治疗中联合应用乙肝免疫球蛋白是因为乙肝免疫球蛋白为HBV中和抗体, 其与HBV相应抗原结合形成复合物, 有利于抗原提呈细胞摄取, 增加HBsAg内吞数量, 增强HBsAg特异性克隆的增生, 便于HBV清除[12].

总之, HBsAg冲击致敏的DC疫苗可用于HBeAg阴性CHB患者的治疗, 但疗效尚不理想. 今后应加强DC功能恢复的再研究, 还可利用CpG基序的寡聚脱氧核苷酸(CPGODN)等一系列新型佐剂增强HBsAg抗原性, 或利用HBV抗原肽基因转染DC等, 以求取得更佳疗效.

评论
背景资料

HBeAg阴性慢性乙型肝炎在慢性乙型肝炎中所占比例逐年上升, 而目前尚未有理想的治疗措施.

应用要点

利用HBsAg抗原肽冲击致敏树突状细胞并联合乙肝免疫球蛋白对HBeAg(-)慢性乙型肝炎有一定疗效. 此方法采用皮下、肌肉注射, 较静脉注射法使用更方便, 材料更节省, 费用更低廉, 利于患者使用.

同行评价

本文立题新颖, 病例选择合理, 治疗方法可参考, 结论明确, 具有一定的可读性.

编辑: 何燕 电编: 何基才

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